彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤BCL-6、CD10和MUM-1表達(dá)及bcl-2基因重排檢測(cè)的意義.pdf

1、彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma，DLBCL)是非霍奇金淋巴瘤中(non-hodgkin's lymphoma,NHL)中最頻發(fā)的類型。聯(lián)合化療的應(yīng)用提高了DLBCL治療效果，使50﹪的DLBCL患者獲得長期治愈；但仍有50﹪的患者其療效不滿意，其原因尚未清楚。因此，尋找這些難治愈患者的原因成為很多學(xué)者研究的熱點(diǎn)。目前，根據(jù)B細(xì)胞的來源不同將DLBCL分為生發(fā)中心B細(xì)胞樣(germinal

2、center B-cell-like，GCB)型和非生發(fā)中心B細(xì)胞樣(non-germinalcenter B-cell-like，non-GCB)型兩種，GCB型預(yù)后顯著優(yōu)于non-GCB型；同時(shí)也證實(shí)出現(xiàn)bcl-2基因重排是GC來源。用免疫組化方法來探索B細(xì)胞來源時(shí)，國外有用CD10、BCL-6和MUM-1三者聯(lián)合進(jìn)行，國內(nèi)有關(guān)該研究的有效性報(bào)道甚少。本研究通過CD10、BCL-6和MUM-1聯(lián)合檢測(cè)對(duì)DLBCL進(jìn)行亞分類以探討其B

3、細(xì)胞的來源，并通過與bcl-2基因重排檢測(cè)結(jié)果比較以探討免疫分型的有效性，希望為DLBCL的治療和預(yù)后判斷提供科學(xué)的依據(jù)。 材料與方法 1.收集鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院病理科和河南省人民醫(yī)院病理科滿足試驗(yàn)設(shè)計(jì)要求的淋巴結(jié)DLBCL40例。經(jīng)切片、HE染色及免疫組化染色，有兩位病理專家重新閱片確定診斷，整理其臨床資料和石蠟包埋組織標(biāo)本。 2．40例淋巴結(jié)DLBCL石蠟包埋組織抽提DNA，應(yīng)用PCR技術(shù)檢測(cè)bcl-2基

4、因重排同時(shí)應(yīng)用SP免疫組化方法檢測(cè)CD10、BCL-6和MUM-1的表達(dá)，并按照文獻(xiàn)GCB型和non-GCB型的免疫表型標(biāo)準(zhǔn)將40例淋巴結(jié)DLBCL行亞分類。觀察免疫組化結(jié)果及亞分型與bcl-2基因重排亞分型二者在區(qū)分B細(xì)胞來源上有無差別。 結(jié)果 1．組織病理學(xué)分型：40例淋巴結(jié)DLBCL的形態(tài)學(xué)變型有：中心母細(xì)胞型(centroblasticvariant，CB)35例，占87．5﹪(35/40)；免疫母細(xì)胞型(imm

5、unoblasticvariant，IB)3例，占7．5﹪(3/40)；間變大細(xì)胞型(anaplastic variant，ALCL)1例，富于T細(xì)胞/組織細(xì)胞型(T-cell/histocyte-rich variant，TRBL)1例。后兩者各占2．5﹪(1/40)。 2．結(jié)內(nèi)DLBCL CD10，BCL-6和MUM-1的表達(dá)單克隆抗體CD10陽性表達(dá)定位于胞膜，而BCL-6和MUM-1陽性表達(dá)均定位于胞核。40例結(jié)內(nèi)DL

6、BCL中CD10，BCL-6和MUM-1陽性病例數(shù)分別為11、16、29例，陽性率分別為27．5﹪、40.0﹪和72．5﹪。其中，CD10+/BCL-6+7例，CD10+/MUM-1+6例，BCL-6+/MUM-1+12例，CD10+/BCL-6+/MUM-1+4例。 3．DLBCL免疫組化亞分類結(jié)果按照標(biāo)準(zhǔn)40例LN-DLBCL亞分類如下：GCB型CD10+jfBCL-6+/-/MUM-1+/-11例，CD10-/BCL-6

7、+/MUM-1-2例。non-GCB型CD10/BCL-6-/MUM-1+/-19例，CD10-/BCL-6+/MUM-1+8例。最后結(jié)果GCB型13例，占32．5﹪(13/40)，non-GCB型27例。占67．5﹪(27/40)。 4．結(jié)內(nèi)DLBCL中bcl-2基因重排40例中9例出現(xiàn)bcl-2基因重排，占22．5﹪(9/40)；其中mbr/JH重排8例，占20.0﹪(8/40)，mcr/JH和icr/JH重排各1例，各占2

8、．5﹪(1/40)。其中1例出現(xiàn)mbr/JH和mcr/JH雙重重排占2．5﹪(1/40)。DLBCL中出現(xiàn)bcl-2基因重排視為生發(fā)中心來源，則40例結(jié)內(nèi)DLBCL中GCB型9例，non-GCB型31例。 5．免疫組化亞分類與基因重排檢測(cè)結(jié)果的比較免疫學(xué)亞分類和基因重排檢測(cè)結(jié)果兩種方法區(qū)分GCB型和non．GCB型檢測(cè)結(jié)果無顯著性差異(p>0.05)。單獨(dú)BCL-6蛋白表達(dá)與bcl-2重排無相關(guān)性(P>O．05)，CD10蛋白表

9、達(dá)與bcl-2重排正相關(guān)關(guān)系(γ=0．339,P<0.05)，MUM-1蛋白表達(dá)與bcl-2重排成負(fù)相關(guān)(γ=．0．339,P<0.05)。 6．免疫組化與基因重排同時(shí)應(yīng)用 CD10、BCL-6和MUM-1免疫組化GCB型檢測(cè)率37.5﹪(15/40)，基因重排GCB型檢測(cè)率的22.5﹪(9/40)，兩種方法結(jié)合GCB型檢測(cè)率提高到40﹪(16/40)。 結(jié)論 1．BCL-6、CD10和MUM-1三種抗體結(jié)合可

10、區(qū)分DLBCL中B細(xì)胞的來源并對(duì)DLBCL進(jìn)行亞分類，指導(dǎo)臨床預(yù)后。 2．免疫組化和基因重排對(duì)DLBCL進(jìn)行亞分類，二者亞分類結(jié)果相同。CD10是較好的生發(fā)中心細(xì)胞標(biāo)記物，單獨(dú)應(yīng)用可以進(jìn)行DLBCL亞分類，但須與其他抗體結(jié)合以提高GCB型檢出率。 3．BCL-6、CD10和MUM．1免疫組化檢測(cè)對(duì)DLBCL亞分類簡單易行。 4．BCL-6、CD10和MUM-1免疫組化和bcl-2基因重排結(jié)合可以提高GCB型的檢出