青石斑魚(yú)細(xì)胞色素C氧化酶亞基Ⅰ(COXⅠ)基因克隆鑒定、表達(dá)分析及蛋白質(zhì)部分序列的釀酒酵母表達(dá)研究.pdf

1、細(xì)胞色素C氧化酶(Cytochrome oxidase,COX)是線粒體中重要的能量代謝分子,其功能是進(jìn)行呼吸鏈電子傳遞,即承擔(dān)著從細(xì)胞色素C(Cytochrome c)到氧分子(O2)的電子傳遞功能,同時(shí)催化氧分子還原并偶聯(lián)質(zhì)子泵。細(xì)胞色素C氧化酶亞基Ⅰ(COXⅠ)是COX具有酶催化活性的三個(gè)亞基之一,是COX最大最保守的亞基。
　　 青石斑魚(yú)(Epinephelus awoara)屬鱸形目,鮨科,石斑魚(yú)亞科,石斑魚(yú)屬的海洋珊

2、瑚礁魚(yú)類(lèi),是我國(guó)海水養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)中最具經(jīng)濟(jì)價(jià)值的名貴魚(yú)類(lèi)之一。本研究以本實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建的青石斑魚(yú)消減雜交cDNA文庫(kù)中長(zhǎng)587bp的EST序列為基礎(chǔ),采用RACE-PCR方法,克隆鑒定了青石斑魚(yú)細(xì)胞色素C氧化酶亞基Ⅰ基因。結(jié)果表明:青石斑魚(yú)COXⅠ全長(zhǎng)1659bp,5'端非編碼區(qū)3 bp,3'端非編碼區(qū)105 bp,開(kāi)放閱讀框1551bp,編碼516個(gè)氨基酸。序列分析表明青石斑魚(yú)COXⅠ與線紋刺尾鯛COXⅠ同源性最高,達(dá)96.9％。
　　

3、 采用RT-PCR方法研究COXⅠ基因在青石斑魚(yú)各組織中的表達(dá)特征,結(jié)果表明COXⅠ基因在正常的青石斑魚(yú)和注射了副溶血弧菌滅活疫苗的青石斑魚(yú)的脾、肝、心、頭腎、腎、肌肉和鰓中都有轉(zhuǎn)錄表達(dá)。注射副溶血弧菌滅活疫苗后,除了鰓組織,其他組織中COXⅠ基因表達(dá)量較對(duì)照組都有顯著提高(p＜0.05),而鰓組織中的COXⅠ基因表達(dá)量沒(méi)有顯著變化。
　　 細(xì)胞色素C氧化酶亞基Ⅰ基因由線粒體基因組編碼,因編碼規(guī)則不同于通用遺傳密碼而很難直接進(jìn)