青石斑魚細(xì)胞色素C氧化酶亞基Ⅰ(COXⅠ)基因克隆鑒定、表達(dá)分析及蛋白質(zhì)部分序列的釀酒酵母表達(dá)研究.pdf

1、細(xì)胞色素C氧化酶(Cytochrome oxidase,COX)是線粒體中重要的能量代謝分子,其功能是進(jìn)行呼吸鏈電子傳遞,即承擔(dān)著從細(xì)胞色素C(Cytochrome c)到氧分子(O2)的電子傳遞功能,同時(shí)催化氧分子還原并偶聯(lián)質(zhì)子泵。細(xì)胞色素C氧化酶亞基Ⅰ(COXⅠ)是COX具有酶催化活性的三個(gè)亞基之一,是COX最大最保守的亞基。
　　 青石斑魚(Epinephelus awoara)屬鱸形目,鮨科,石斑魚亞科,石斑魚屬的海洋珊

2、瑚礁魚類,是我國(guó)海水養(yǎng)殖魚類中最具經(jīng)濟(jì)價(jià)值的名貴魚類之一。本研究以本實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建的青石斑魚消減雜交cDNA文庫(kù)中長(zhǎng)587bp的EST序列為基礎(chǔ),采用RACE-PCR方法,克隆鑒定了青石斑魚細(xì)胞色素C氧化酶亞基Ⅰ基因。結(jié)果表明:青石斑魚COXⅠ全長(zhǎng)1659bp,5'端非編碼區(qū)3 bp,3'端非編碼區(qū)105 bp,開放閱讀框1551bp,編碼516個(gè)氨基酸。序列分析表明青石斑魚COXⅠ與線紋刺尾鯛COXⅠ同源性最高,達(dá)96.9％。
　　

3、 采用RT-PCR方法研究COXⅠ基因在青石斑魚各組織中的表達(dá)特征,結(jié)果表明COXⅠ基因在正常的青石斑魚和注射了副溶血弧菌滅活疫苗的青石斑魚的脾、肝、心、頭腎、腎、肌肉和鰓中都有轉(zhuǎn)錄表達(dá)。注射副溶血弧菌滅活疫苗后,除了鰓組織,其他組織中COXⅠ基因表達(dá)量較對(duì)照組都有顯著提高(p＜0.05),而鰓組織中的COXⅠ基因表達(dá)量沒有顯著變化。
　　 細(xì)胞色素C氧化酶亞基Ⅰ基因由線粒體基因組編碼,因編碼規(guī)則不同于通用遺傳密碼而很難直接進(jìn)