γ-分泌酶抑制劑DAPT對酵母多糖所致急性肺損傷及全身性炎癥反應(yīng)的保護(hù)作用研究.pdf

1、膿毒癥（sepsis）引起的多器官功能障礙綜合征（MODS）是重癥監(jiān)護(hù)室（ICU）內(nèi)死亡的主要原因。在MODS中，肺是最常受累的器官，且其衰竭常常先于其它器官。而在膿毒癥發(fā)展到MODS的病理生理過程中，全身炎癥反應(yīng)綜合征(SIRS)扮演著重要的角色，且被認(rèn)為是重癥疾病發(fā)展到MODS的共同通路。近年來，雖然針對MODS及其相關(guān)肺損傷的診治研究有很大進(jìn)展，救治成功率也有所提高，但其總體死亡人數(shù)仍維持較高水平，故迫切需要尋找更加有效的治療手段

2、。近來大量研究證實(shí)，notch信號通路在免疫炎癥反應(yīng)的調(diào)控中起重要作用，特別是有文獻(xiàn)報(bào)道阻斷notch信號可提高膿毒癥動(dòng)物的生存率。因此，我們提出假設(shè)，調(diào)控notch信號可對MODS及其肺損傷產(chǎn)生保護(hù)作用。本課題擬采用酵母多糖腹腔注射所致小鼠MODS模型，研究γ-分泌酶抑制劑DAPT對酵母多所致急性肺損傷及全身性炎癥反應(yīng)可能的保護(hù)作用。
　　材料與方法
　　1.雄性昆明小白鼠（20-25g），隨機(jī)分為7組，0h組、1h組、6

3、h組、12h組、24h組、48h組、72h組。給予動(dòng)物酵母多糖腹腔注射（1g/kg）誘導(dǎo)MODS模型。0h時(shí)腹腔注射等量生理鹽水作為對照。模型制作后0h、1h、6h、12h、24h、48h及72h后處死動(dòng)物，取肺組織檢測其notch胞內(nèi)域（NICD）的蛋白表達(dá)水平。
　　2.雄性昆明小白鼠（20-25g），隨機(jī)分為6組，“生理鹽水+DMSO”組、“生理鹽水+DAPT”組、“酵母多糖+DMSO1”組、“酵母多糖+DMSO2”組、“酵

4、母多糖+DAPT1”組、“酵母多糖+DAPT2”組(1:造模前;2:造模后)。給予動(dòng)物腹腔注射酵母多糖（1g/kg）誘導(dǎo)MODS模型，腹腔注射等容積的生理鹽水作為對照。DAPT治療：注射酵母多糖前30分鐘或后1小時(shí)給予動(dòng)物靜脈注射DAPT（40mg/kg），等量DMSO作為溶劑對照。模型制作后1、2、3、5、7天觀察各組動(dòng)物存活率。模型制作后24小時(shí)檢測小鼠肺組織NICD表達(dá)、肺損傷情況（肺組織病理；支氣管肺泡灌洗液蛋白漏出、肺干濕重比

5、值；支氣管肺泡灌洗液細(xì)胞計(jì)數(shù)，肺炎性因子表達(dá)）、全身炎癥反應(yīng)及組織損傷（血清LDH、CRP及TNF-α水平）。
　　結(jié)果
　　1．酵母多糖腹腔注射后，小鼠肺組織NICD表達(dá)逐漸上調(diào)，至24h達(dá)到高峰。DAPT可部分逆轉(zhuǎn)酵母多糖所致肺組織NICD表達(dá)上調(diào)。
　　2．酵母多糖腹腔注射后，小鼠7d生存率為15％，24小時(shí)后小鼠出現(xiàn)明顯的肺組織病理損傷；肺支氣管肺泡灌洗液蛋白漏出增加，肺干濕重比值增大；支氣管肺泡灌洗液中炎性細(xì)