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文檔簡介
1、目的:研究NKCC1、KCNQ1兩種鈉鉀離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白在C57BL/6J小鼠耳蝸組織中的表達(dá)分布,以及隨鼠齡增加其表達(dá)含量的變化,探討這兩種蛋白在年齡相關(guān)性聽力損失(AHL)發(fā)生中的作用。
方法:采用免疫熒光組織化學(xué)(Immunofluorescence Histochemistry,IH)技術(shù),檢測NKCC1、KCNQ1兩種鉀離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白在不同鼠齡(4周、12周、26周、52周)C57BL/6J小鼠耳蝸中的表達(dá)分布和表達(dá)含量與
2、鼠齡的關(guān)系。運(yùn)用實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)(Real time-polymerase chain reaction, RT-PCR)技術(shù),檢測隨鼠齡增加,兩種離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白在mRNA水平的變化。
結(jié)果:免疫熒光組織化學(xué)檢測提示NKCC1主要分布在C57BL/6J小鼠內(nèi)耳血管紋、螺旋韌帶、毛細(xì)胞、螺旋板和螺旋神經(jīng)節(jié)細(xì)胞;KCNQ1主要表達(dá)于C57BL/6J小鼠內(nèi)耳血管紋邊緣細(xì)胞。隨著鼠齡的增加,NKCC1、KCNQ1熒光強(qiáng)度呈減弱趨勢。
3、實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果顯示NKCC1、KCNQ1在mRNA水平表達(dá)量隨年齡下降。
結(jié)論:NKCC1、KCNQ1鉀離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白在年齡相關(guān)性聽力損失中意義重大。本研究發(fā)現(xiàn)NKCC1主要表達(dá)于C57BL/6J小鼠耳蝸的血管紋、螺旋韌帶、毛細(xì)胞、螺旋板和螺旋神經(jīng)節(jié)細(xì)胞,KCNQ1主要表達(dá)于血管紋的邊緣細(xì)胞。隨著鼠齡的增長,在mRNA和蛋白質(zhì)水平的表達(dá)量表現(xiàn)為:NKCC1在26周、52周明顯下降,且52周與4周、12周相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;
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