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1、目的:構(gòu)建D-半乳糖老年性聾豚鼠模型,探討超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)在豚鼠老年性聾發(fā)病中的作用及電針耳穴對(duì)老年性聾的防治作用和機(jī)制。
方法:采用成年雜色豚鼠(體重300-550g)30只,隨機(jī)分成三組:對(duì)照組10只,D-半乳糖模型組10只,D-半乳糖+電針組10只。采用2年雜色豚鼠(體重600-900g)10只作為老年組。豚鼠飼養(yǎng)一周后,D-半乳糖模型組給予D-半乳糖(300mg/kg)
2、頸背部皮下注射,每日一次,連續(xù)六周;D-半乳糖+電針組給予等比例體重的D-半乳糖頸背部皮下注射,同時(shí)給予電針聽(tīng)宮和翳風(fēng)兩穴位,每日一次,連續(xù)六周;對(duì)照組給予等量生理鹽水頸背部皮下注射,每日一次,連續(xù)六周;老年組低噪聲環(huán)境下飼養(yǎng)。造模制備后于我科門(mén)診聽(tīng)力學(xué)中心進(jìn)行聽(tīng)性腦干反應(yīng)(ABR)測(cè)定后處死,取每組豚鼠的耳蝸核、下丘和聽(tīng)皮層,考馬斯亮蘭測(cè)定蛋白含量,分光光度儀檢測(cè)上述組織中SOD的表達(dá)情況,計(jì)算SOD的活性。各組部分聽(tīng)皮層迅速置于4%
3、多聚甲醛液中固定,石蠟切片HE染色觀察各組中聽(tīng)皮層神經(jīng)元的形態(tài)。數(shù)據(jù)采用方差分析方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
結(jié)果:1.D-半乳糖模型組和老年組豚鼠均出現(xiàn)老化癥狀:聽(tīng)力逐漸減退、食欲下降和脫毛等現(xiàn)象提示造模成功。2.ABR測(cè)定結(jié)果:正常對(duì)照組的ABR閾值為39.00±7.38dB SPL.D-半乳糖模型組、D-半乳糖+電針組和老年組的ABR閾值分別79.44±6.62、70.00±5.88和81.88±4.43 dB SPL(各實(shí)驗(yàn)組
4、和老年組與正常對(duì)照組比較,P<0.001)。3.超氧化物歧化酶SOD活性測(cè)定:與正常對(duì)照組比較,D-半乳糖模型組和老年組,耳蝸核、下丘和聽(tīng)皮層中SOD活性均下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);與D-半乳糖模型組比較,D-半乳糖+電針組,三個(gè)部位的SOD活性均增高(P<0.01)。
結(jié)論:1.D-半乳糖300mg/kg頸背部皮下注射6周可建立老年性聾豚鼠模型。2.D-半乳糖可以導(dǎo)致豚鼠聽(tīng)覺(jué)中樞的老化。3.聽(tīng)覺(jué)中樞的老化可能與
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