不同毒力鉤端螺旋體引起的病變和細(xì)胞因子表達(dá)的差異.pdf

1、鉤端螺旋體病（簡稱鉤體?。┦怯芍虏⌒糟^端螺旋體（簡稱鉤體）引起的人獸共患性傳染病。鉤體病的病理形態(tài)學(xué)特點(diǎn)為肝、腎、肺等多臟器的彌漫性出血和輕度炎癥反應(yīng)，但出血和炎癥反應(yīng)輕微的機(jī)制均未闡明。 本課題通過體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)比較不同毒力鉤體引起的病理改變和細(xì)胞因子表達(dá)的差異。在豚鼠腹腔內(nèi)分別注射致病性問號(hào)鉤體黃疸出血群賴型有毒株Lai株，賴型無毒株IPAV株，以及非致病性雙曲鉤體三寶壟群Patoc型Patoc 1株，觀察豚鼠各臟器的病理改

2、變；EnVision二步法檢測鉤體抗原在豚鼠組織中的分布；用PCR法檢測鉤體16S rDNA片段在豚鼠血液和組織中的分布；應(yīng)用Real-time RT-PCR法檢測豚鼠血液中細(xì)胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-12、MCP-1 mRNA表達(dá)的變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn)在豚鼠體內(nèi)IPAV株和Patoc 1株不能引起豚鼠組織病變，也未在豚鼠的血液和組織中檢測出鉤體的存在；Lai株可以引起豚鼠典型的鉤體病病變，并可以在豚鼠血液和組織中檢測到鉤體的存在和

3、分布。三株鉤體在感染早期皆能引起豚鼠血液中細(xì)胞因子表達(dá)的升高，在感染24小時(shí)后 IFN-γ、TNF-α、IL-12、MCP-1 mRNA表達(dá)升高倍數(shù)在Patoc 1株感染組中分別為8.7、27.2、15、4.8，在IPAV株感染組中為8.9、10.8、3.8、8.4，在Lai株組中為4.5、3.7、1.6、2.9。但與Patoc 1株和IPAV株感染組相比，Lai株引起豚鼠血液中細(xì)胞因子表達(dá)升高的水平較低，差異有統(tǒng)計(jì)意義（p<0.05）

4、。 在體外三株鉤體分別與人單核巨噬細(xì)胞THP-1相互作用，應(yīng)用Real-time RT-PCR法檢測TLR2、TLR4、iNOS基因表達(dá)的變化，通過Real-time RT-PCR和ELISA法檢測細(xì)胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-12、MCP-1的表達(dá)的改變。結(jié)果顯示Patoc 1株可以引起巨噬細(xì)胞TLR2、TLR4和iNOS基因表達(dá)上調(diào)，而IPAV株和Lai株主要引起TLR4和iNOS基因表達(dá)升高，但I(xiàn)PAV株誘導(dǎo)能力更