清道夫受體A在小鼠巨噬細(xì)胞抗鉤端螺旋體中的作用研究.pdf

1、第一部分清道夫受體A在小鼠巨噬細(xì)胞抗鉤端螺旋體中的作用研究
　　致病性鉤端螺旋體所致的鉤體病是一種世界范圍傳播的動物源性疾病。機(jī)體的固有免疫在清除鉤體的過程中發(fā)揮了重要作用。但是，除了巨噬細(xì)胞的補(bǔ)體受體以外，尚未發(fā)現(xiàn)鉤體的其它吞噬受體。清道夫受體A(SR-A)等巨噬細(xì)胞表面的模式識別受體參與機(jī)體抗外來微生物的感染，結(jié)合前期SR-A參與鉤體吞噬的工作基礎(chǔ)，我們提出巨噬細(xì)胞可通過SR-A識別并吞噬鉤體、參與固有免疫和調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)的假說

2、。本研究發(fā)現(xiàn)，通過流式細(xì)胞術(shù)和激光共聚焦顯微鏡等方法，用特異性化學(xué)抑制劑Polyl和SR-A單克隆抗體封閉巨噬細(xì)胞SR-A，在缺乏血清補(bǔ)體調(diào)理的情況下，兩者均能有效抑制小鼠巨噬細(xì)胞對鉤體的吞噬。慢病毒轉(zhuǎn)染SR-A的HEK293T細(xì)胞與空載細(xì)胞相比，顯著增強(qiáng)了對鉤體的粘附作用。SR-A基因敲除（SR-A-/-）小鼠的巨噬細(xì)胞也表現(xiàn)出顯著降低的吞噬能力。將抽提純化的鉤體LPS包被1μm小珠，發(fā)現(xiàn)WT巨噬細(xì)胞吞噬鉤體LPS包被珠子的能力顯著高

3、于對對照珠子的吞噬，SR-A-/-小鼠的巨噬細(xì)胞對LPS包被珠子的吞噬則明顯低于WT細(xì)胞。同樣地，表達(dá)SR-A的HEK293T細(xì)胞對LPS包被珠子的粘附顯著高于空載細(xì)胞。同時，在鉤體刺激下，SR-A可與TLR4共定位，發(fā)生共受體作用，具有免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)。總的來說，這些結(jié)果表明在鉤體感染過程中，巨噬細(xì)胞可通過SR-A識別鉤體LPS并吞噬鉤體，能與TLR4發(fā)生共受體作用參與機(jī)體的固有免疫和調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)等過程。
　　第二部分尿道致病性大腸

4、埃希菌的耐藥和毒力研究
　　尿道致病性大腸埃希菌是尿路感染的首要致病菌。它的流行病學(xué)數(shù)據(jù)對臨床治療具有指導(dǎo)意義。本研究以2008年在上海收集的198株分離自尿路感染患者的大腸埃希菌為對象，通過藥敏實(shí)驗(yàn)研究耐藥表型，并基于PCR方法在分子水平檢測耐藥和毒力基因。采用脈沖場凝膠電泳(PFGE)和系統(tǒng)發(fā)育群分析菌株的同源性，并研究基因在各群體間的分布與相關(guān)性。藥敏實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)這些細(xì)菌具有極高的多重耐藥(MDR)率(153/198)，以及高達(dá)

5、48.5％(96/198)的超廣譜β內(nèi)酰胺酶(ESBLs)陽性率，并且對青霉素、氟喹諾酮、磺胺類和第一、二代頭孢菌素等高度耐藥。分子水平的結(jié)果顯示這些細(xì)菌以CTX-M-9群(70/96)耐藥基因最為常見，其次為CTX-M-1群(27/96)。系統(tǒng)發(fā)育群D細(xì)菌占總數(shù)的42.4％(84/198)，并在各系統(tǒng)發(fā)育群中擁有最高的ESBL率(50/84)和MDR率(75/84)。各毒力基因在系統(tǒng)發(fā)育群B2細(xì)菌中的比例顯著偏高，但afaBC基因除外