地拉羅司通過Wnt信號(hào)通路抑制肺癌A549細(xì)胞及其機(jī)制的研究.pdf

1、分類號(hào)：R7342密級(jí)：內(nèi)部2年學(xué)位類別：科學(xué)學(xué)位口專業(yè)學(xué)位團(tuán)學(xué)校代碼：10062學(xué)號(hào)：2011601070學(xué)科門類：醫(yī)學(xué)夭肄譬科袁等Ill萋毳黼JI圈嬲毫O|霉；蠢IlI辣麓I垤黯11警博士學(xué)位論文DOCToRALDISSERTATIoN論文題目：地拉羅司通過Wnt信號(hào)通路抑制肺癌A549細(xì)胞，及其機(jī)制的研究TITLEMechanismsonWntSignalingPathwayInhibitingtheProliferationin

2、HumanLungAdenocarcinomaA549CellsbyDeferasirox一級(jí)學(xué)科：臨床醫(yī)學(xué)二級(jí)學(xué)科：外科學(xué)胸心外科論文作者：梁吉祥指導(dǎo)教師：張遜導(dǎo)師組成員：孫大強(qiáng)徐醫(yī)軍天津醫(yī)科大學(xué)研究生院二O一四年五月天津醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文中文摘要目的：1通過研究地拉羅司對(duì)A549細(xì)胞增殖、凋亡以及鐵代謝相關(guān)基因及其表達(dá)產(chǎn)物的影響，從細(xì)胞水平探討鐵螯合劑對(duì)肺癌增殖的作用及機(jī)制。2采用接種裸鼠，創(chuàng)建異種移植瘤模型，研究地拉羅司對(duì)A54

3、9細(xì)胞致瘤能力的影響，探討地拉羅司對(duì)肺癌生長(zhǎng)的影響。3觀察不同濃度的地拉羅司在體外對(duì)肺癌A549細(xì)胞核蛋白pcatenin和信號(hào)通路下游cmyc基因表達(dá)的調(diào)控，探討地拉羅司可能存在的抑制肺癌細(xì)胞增殖的分子學(xué)機(jī)制。方法：1。常規(guī)傳代細(xì)胞培養(yǎng)方法培養(yǎng)肺腺癌細(xì)胞A549，分別以不同濃度(0320pM)的地拉羅司干預(yù)細(xì)胞生長(zhǎng)24和48h后，MTT法檢測(cè)肺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制情況，應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞中凋亡率的變化，分析地拉羅司對(duì)細(xì)胞凋亡的影響，分

4、析藥物濃度和細(xì)胞增殖抑制率之間的關(guān)系。RT—PCR檢測(cè)各組細(xì)胞鐵代謝相關(guān)指標(biāo)Tf、TfRl、Fn、FNP的mRNA水平。24～5周雌性BALB／C(nu／nu)鼠分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組各8只，皮下植入肺癌A549細(xì)胞，腫瘤體積達(dá)100mm3后，實(shí)驗(yàn)組隔日用地拉羅司40mg／kg，對(duì)照組采用等量生理鹽水連續(xù)灌胃，治療3周后處死。觀察成瘤時(shí)間、瘤體平均體積、平均瘤重和血液生化指標(biāo)。3，不同濃度地拉羅司作用后，RT—PCR檢測(cè)各組細(xì)胞Cmyc、1

5、3catenin基因表達(dá)的mRNA水平。Westernblot檢測(cè)各組細(xì)胞cmyc、13catenin的蛋白表達(dá)，進(jìn)而探討地拉羅司的分子學(xué)機(jī)制。爭(zhēng)士甲三口木：l，不同濃度地拉羅司對(duì)A549細(xì)胞生長(zhǎng)有抑制作用，與對(duì)照組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義舊0001)。隨著濃度的增加，抑制增殖作用增強(qiáng)。隨著時(shí)間延長(zhǎng)，地拉羅司80pm／L、160pm／L、3209m／L組48h抑制增殖作用強(qiáng)于24h，48h抑制增殖的作用與24h相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0