中藥有效成分KBA抑制HEL和DAMI白血病細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)凋亡及增加化療藥敏的研究.pdf

1、目的：觀察從人參總皂苷分離出的有效成分KBA（暫命名）對人紅系HEL和巨核系DAMI白血病細(xì)胞的增殖抑制、誘導(dǎo)凋亡及與化療藥物的協(xié)同作用，證實KBA組分抗白血病的作用。
　　方法：從人參總皂苷進(jìn)一步分離出有效成分KBA，采用瓊脂半固體集落培養(yǎng)增殖試驗、化療藥物敏感性試驗、液體培養(yǎng)MTT試驗、流式細(xì)胞術(shù)Annexin V分析、瓊脂糖凝膠電泳分析DNA降解梯形條帶、凋亡細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察等方法，觀察不同濃度的KBA對白血病細(xì)胞的增殖抑制、

2、誘導(dǎo)凋亡及與化療藥物的協(xié)同作用。
　　結(jié)果：（1）KBA能夠直接地抑制 HEL、DAMI白血病細(xì)胞增殖，集落生成數(shù)明顯減少（P分別<0.01），小劑量10mg/L起效，隨著劑量加大，作用更為明顯，呈劑量依賴關(guān)系。KBA10～100mg/L對HEL、DAMI白血病集落生成的抑制率分別達(dá)到25.8～92.3％、21.5～89.9％。
　　（2）液體培養(yǎng)KBA作用細(xì)胞72h后MTT檢測，KBA10～100mg/L能夠直接地抑制白血

3、病細(xì)胞增殖，吸光度明顯下降，低于對照組（P分別<0.01），對HEL、DAMI白血病細(xì)胞的抑制率分別達(dá)到28.5～51.1％、58.2～75.9％。
　?。?）KBA與化療藥高三尖杉酯堿（Hom）、阿糖胞苷（Ara-c）聯(lián)合應(yīng)用可以增加HEL、DAMI白血病細(xì)胞化療藥對的敏感性，集落生成數(shù)明顯減少（P分別<0.01）。小劑量10mg/L即可起作用，隨著劑量加大，作用更為明顯，KBA20mg/L增強(qiáng)化療藥物Hom、Ara-c的殺傷作

4、用2.70～4.52倍。
　?。?）KBA10～150mg/L作用于48h，能夠誘導(dǎo)HEL、DAMI白血病細(xì)胞凋亡，Annexin V陽性細(xì)胞率分別為5.43～43.50％、15.30～51.65％，明顯高于對照組（P分別<0.05或<0.01）。
　?。?）形態(tài)學(xué)特征出現(xiàn)凋亡小體，瓊脂糖凝膠電泳分析出現(xiàn)凋亡典型的DNA降解梯形條帶。
　　結(jié)論：KBA能夠抑制HEL和DAMI白血病細(xì)胞增殖，并呈劑量依賴關(guān)系。低濃度10