苔黑酚葡萄糖苷對(duì)慢性應(yīng)激大鼠抑郁相關(guān)行為的影響及部分機(jī)制研究.pdf

1、抑郁癥(depression)是一種發(fā)病原因復(fù)雜的疾病,對(duì)人類的身心健康有很大的危害,抗抑郁癥藥物主要有選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑(SSRI)、去甲腎上腺素再攝取抑制劑和單胺氧化酶抑制劑等,但是其副作用較多。研究發(fā)現(xiàn)天然藥物中安全有效的中草藥有望于開(kāi)發(fā)成新的抗抑郁藥物,苔黑酚葡萄糖苷(Orcinol glucoside,OG)是從中草藥仙茅中分離出的一個(gè)化合物,體外實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明其在神經(jīng)方面有顯著的保護(hù)作用。本研究采用慢性不可預(yù)見(jiàn)性

2、溫和應(yīng)激(CUMS)方法建立大鼠抑郁癥模型,并在此模型基礎(chǔ)上探討其在抗抑郁癥的可能作用分子機(jī)制。
　　目的:本研究運(yùn)用慢性不可預(yù)見(jiàn)性溫和應(yīng)激(CUMS)方法建立大鼠抑郁癥模型;研究CUMS對(duì)大鼠行為學(xué)的影響。應(yīng)激后的大鼠給予苔黑酚葡萄糖苷(Orcinol glucoside,OG),探討苔黑酚葡萄糖苷對(duì)大鼠抑郁癥的作用及其可能作用分子機(jī)制。
　　方法:
　　1.建立慢性不可預(yù)見(jiàn)溫和應(yīng)激(CUMS)大鼠抑郁癥模型:

3、>　　14只Sprague-Dawley雄性大鼠,按照體重隨機(jī)分為正常組(Control組)、模型組(CUMS組);模型組大鼠連續(xù)21天給予孤養(yǎng)加慢性不可預(yù)見(jiàn)性溫和應(yīng)激,每周稱量體重一次,曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)(OFT)、糖水偏愛(ài)實(shí)驗(yàn)各一次;懸尾實(shí)驗(yàn)(TST)和強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)(FST)在21天應(yīng)激結(jié)束后進(jìn)行。計(jì)算腎上腺指數(shù),并采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA)測(cè)量血清中皮質(zhì)酮（CORT)的含量,實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Q-PCR)檢測(cè)下丘腦中CRH mRNA

4、表達(dá)。
　　2.OG對(duì)CUMS大鼠的抗抑郁作用機(jī)制研究:
　　54只Sprague-Dawley雄性大鼠,按照體重隨機(jī)分為正常組(0.9％生理鹽水)、陽(yáng)性藥氟西汀組(2mg/kg)、模型組(CUMS組,0.9%生理鹽水)、OG低劑量組(1.5mg/kg)、OG中劑量組(3mg/kg)、OG高劑量組(6mg/kg),每組9只,建立慢性不可預(yù)見(jiàn)性溫和應(yīng)激抑郁癥模型。應(yīng)激2周后各組按上述劑量灌胃給藥,每日一次,持續(xù)7天,灌胃體積按

5、照2ml/200g計(jì)算。在第22-25天對(duì)大鼠進(jìn)行行為學(xué)測(cè)試,包括曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)(OFT)、糖水偏愛(ài)實(shí)驗(yàn)、懸尾實(shí)驗(yàn)(TST)和強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)(FST)。行為學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后次日取材。應(yīng)激前后每周測(cè)量一次大鼠體重,采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定大鼠血清中皮質(zhì)酮(CORT)的含量,使用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（Q-PCR)檢測(cè)下丘腦中CRH mRNA的表達(dá);用Western Blot法檢測(cè)海馬中BDNF、p-ERK1/2和ERK1/2的蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果:<

6、br>　　1.連續(xù)21天孤養(yǎng)加慢性不可預(yù)見(jiàn)性溫和應(yīng)激后,大鼠體重增加量顯著減少。與正常組比較,CUMS組大鼠的糖水偏愛(ài)指數(shù)顯著減少;曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中自主活動(dòng)減少;在強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中不動(dòng)時(shí)間延長(zhǎng),游泳時(shí)間和掙扎時(shí)間顯著減少;在懸尾實(shí)驗(yàn)中CUMS組大鼠的不動(dòng)時(shí)間增加。大鼠腎上腺指數(shù)無(wú)變化,ELISA檢測(cè)結(jié)果顯示,CUMS組大鼠血清的CORT含量明顯增加,CRH的mRNA的表達(dá)也增加。
　　2.與CUMS模型組大鼠比較,OG(1.5mg/kg)

7、及氟西汀(2mg/kg)灌胃給藥可顯著增加大鼠在曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中的直立次數(shù)、自主活動(dòng)和理毛次數(shù)。糖水偏愛(ài)實(shí)驗(yàn)中OG(1.5、3、6mg/kg)及氟西汀(2mg/kg)給藥組大鼠的糖水偏愛(ài)指數(shù)均顯著性增加。OG(1.5、3、6mg/kg)及氟西汀(2mg/kg)ig給藥可顯著縮短CUMS大鼠在強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)和懸尾實(shí)驗(yàn)中的不動(dòng)時(shí)間,并增加其游泳時(shí)間。與CUMS模型組大鼠比較,OG(1.5、3、6mg/kg)及氟西汀(2mg/kg)ig給藥組大鼠血清