帕金森病小鼠血漿IL-10的水平變化及其臨床意義.pdf

1、帕金森病(PD)是僅次于阿爾茨海默病的第二大神經(jīng)變性疾病，60歲以上人群的患病率約為2％。目前PD的發(fā)病機制尚未明確，遺傳、環(huán)境因素、感染、衰老、氧化應(yīng)激、過多的自由基形成及神經(jīng)生長因子缺乏等與其發(fā)病有關(guān)，也可能是多種機制協(xié)同作用的結(jié)果。自1978年Abramsky等提出免疫異?？赡芘c帕金森病的發(fā)病有關(guān)以來，免疫反應(yīng)和炎癥過程與帕金森病疾病進展及黑質(zhì)紋狀體損傷的關(guān)系日益受到關(guān)注。在帕金森病患者及MPTP帕金森病小鼠模型黑質(zhì)致密部也觀察到

2、CD4+和CD8+細胞的存在，而且已經(jīng)證實在帕金森病的動物模型中，CD4+淋巴細胞的腦實質(zhì)侵潤促進神經(jīng)元的死亡。
　　 現(xiàn)在大多數(shù)針對神經(jīng)炎癥的研究以小膠質(zhì)細胞和星形膠質(zhì)細胞為中心展開，而近來對帕金森病的神經(jīng)炎癥的研究又有了新的認識。越來越多的證據(jù)表明帕金森病的發(fā)病及進展過程中免疫異常不僅存在于中樞神經(jīng)系統(tǒng)中，也存在于外周免疫系統(tǒng)。白介素10((interleukin-10，IL-10)是作為一種抗炎細胞因子，其分布廣泛，具有多

3、種生物學(xué)活性。IL-10主要由人CD4+的T細胞(Th0、Th1、Th2細胞)分泌，研究證實IL-10主要的生物學(xué)功能是抑制和終止炎癥反應(yīng)，幾乎抑制所有促炎性細胞因子的合成與釋放。本實驗對帕金森病小鼠血漿中IL-10水平的變化進行研究。
　　 目的：
　　 建立帕金森病小鼠模型并探討帕金森病小鼠血漿中IL-10水平的變化。
　　 方法：
　　 實驗動物：C57BL/6J雄性小鼠30只，體重25g-30g，

4、自由攝取食物和水，適應(yīng)環(huán)境一周后進行實驗，動物房溫度控制在20-22℃，12小時明暗交替。動物分組按隨機分組原則，分為MPTP組，生理鹽水組，空白組。每組10只。
　　 PD模型建立：C57BL/6J雄性小鼠腹腔注射MPTP(sigma)25mg/kg，連續(xù)7天；生理鹽水組：與MPTP組同天進行腹腔注射同體積的生理鹽水，連續(xù)7天；空白組：除不作MPTP或生理鹽水注射外，其他條件與MPTP組和生理鹽水組相同。
　　 取材：

5、3組均在第7天注射完畢后于第24小時摘除眼球取血，分離血漿于-20℃保存待測；斷頭取腦，常規(guī)石蠟切片，TH免疫組化染色。
　　 外周血血漿IL-10檢測：采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)進行細胞因子測定。試劑盒購自(R&D)。按說明書進行檢測；實驗數(shù)據(jù)經(jīng)SPSS16.0統(tǒng)計軟件處理，計量資料數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標準差表示，組間比較采用單因素方差分析，p<0.05有顯著性差異。
　　 結(jié)果
　　 帕金森病模型小鼠行為學(xué)改