辣椒材料的形態(tài)學和RAPD分析.pdf

1、本試驗采用了28份辣椒材料，調查了第一開花節(jié)位、平均株高、果長、果徑、果肉厚和單果重6個植物學性狀，運用CTAB法提取了材料的DNA，并對RAPD反應條件進行了優(yōu)化，利用植物學性狀和RAPD技術對這28個材料進行了聚類分析。主要結果如下： 1.利用改良CTAB法提取了材料的DNA，其OD260/OD280比值大多在1.8-2.0之間，OD260/OD230大于2，所提取的DNA含有較少的雜質，符合RAPD的要求。 2.采

2、用單因素逐項優(yōu)化的方法，建立了RAPD優(yōu)化反應體系為：20μl反應體系中，Taq酶1.0U，dNTP0.2mmol/L，Mg2+2.0mmol/L，隨機引物0.2μmol/L，模板DNA80ng，10×PCRbuffer2.0μl，其余用ddH2O補足，最后加10μl礦物油覆蓋。擴增程序為：94℃預變性4min，94℃變性1min，37℃退火1min，72℃延伸1.5min，40個循環(huán)，72℃延伸7min，4℃保存。 3.從38

3、個隨機引物中篩選出13個多態(tài)性好的隨機引物，用這13個引物對28個辣椒材料進行擴增，共擴增出了157條帶，平均每條引物獲得12.1條，其中多態(tài)性帶128條，多態(tài)性比率為81.52％，平均每條引物獲得多態(tài)性帶9.9條。 4.形態(tài)學聚類結果把28份材料分為5類。第一類包括20號朝天椒-4、21號朝天椒-5、23號朝天椒-7、2號野山椒-1、22號朝天椒-6、26號山東七星、3號野山椒-2、4號紫色五彩椒、17號朝天椒-1、19號朝天

4、椒-3、24號朝天椒天米、18號朝天椒-2、8號二金條；第二類包括7號惠香、25號長錐型紅彩椒、9號長椒7＃、12號辣椒118＃、27號抗病一號、13號新紅、28號九香；第三類包括10號長椒2-1、14號黃玉、16號勝利、15號東方，5號膠州長辣椒、6號千惠；第四類為1號墨西哥；第六類為11號落椒98＃。 5.RAPD聚類結果：利用NTSYSpc軟件分析RAPD數(shù)據(jù)，在相似系數(shù)為0.780處把28份辣椒材料分為六大類。第一類為1

5、號墨西哥椒，是四川農(nóng)業(yè)大學引進的國外品種；第二類包括16號勝利、7號惠香、13號新紅、14號黃玉、6號千惠、5號膠州長辣椒、8號二金條、9號長椒2-1、12號辣椒118＃、10號長椒7＃；第三類為11號落椒98＃；第四類包括2號野山椒-1、4號紫色五彩椒、3號野山椒-2、15號東方這4份材料：第五類包括26號山東七星、22號朝天椒-6、21號朝天椒-5、24號朝天椒天米、25號長錐形紅彩椒、20號朝天椒-3、23號朝天椒-7、17號朝天