基于癌癥干細(xì)胞的慢性粒細(xì)胞性白血病的藥物篩選及其機(jī)制研究.pdf

1、慢性粒細(xì)胞性白血病(Chronic Granulocytic Leukemia，CGL)是一種惡性克隆性疾病，這種疾病是由于造血干細(xì)胞的惡性克隆而引起。該疾病發(fā)病率很高，從目前全球抗癌藥物的現(xiàn)狀來(lái)看，抗癌臨床藥物難以根除癌癥，大多數(shù)癌癥患者只能有限地延長(zhǎng)生命，且不少癌癥的復(fù)發(fā)比例很高。造成這一現(xiàn)狀的根源在于目前的抗癌藥物忽略了癌癥干細(xì)胞。因此，研究靶向癌癥干細(xì)胞的藥物具有非常重要的意義，并可能改變抗癌藥物的研究方向及抗癌藥物的臨床評(píng)估標(biāo)

2、準(zhǔn)。隨著科學(xué)的不斷探索，市面上出現(xiàn)了伊馬替尼，尼羅替尼以及雙靶點(diǎn)藥物達(dá)沙替尼等好的抑制劑，但隨著用藥時(shí)間的增長(zhǎng)，患者的耐藥性慢慢出現(xiàn)，并且這些藥物的價(jià)格昂貴，極少數(shù)可承受。因此本項(xiàng)目組擬以伊馬替尼，尼羅替尼和達(dá)沙替尼為基本骨架，進(jìn)行優(yōu)化，合成系列伊馬替尼，尼羅替尼以及達(dá)沙替尼的類(lèi)似物，我們通過(guò)蛋白，細(xì)胞水平和動(dòng)物活性測(cè)試以及其抑制機(jī)制的研究，找到先導(dǎo)化合物，降低成本，有望取代伊馬替尼類(lèi)抗癌藥是迫在眉睫的事情。
　　本課題通過(guò)對(duì)K5

3、62細(xì)胞系和HL60細(xì)胞系的化合物篩選，其中，Ima14和Nil3號(hào)化合物的抑制率均強(qiáng)烈地大于對(duì)照藥物伊馬替尼和尼羅替尼，IC50值分別O.029μmol/L，0.038μmol/L，。我們通過(guò)對(duì)靶點(diǎn)蛋白的活性抑制分析得到了效果較好的Nil3號(hào)化合物，其抑制率與尼羅替尼相似，大于伊馬替尼，同時(shí)我們?cè)趧?dòng)物水平測(cè)試了其毒性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，Nil3號(hào)化合物的活性很高，但毒性較大，所以我們將在后續(xù)的研究中繼續(xù)對(duì)其進(jìn)行結(jié)構(gòu)的優(yōu)化。同時(shí)，在干祖細(xì)胞

4、系KG-1a的篩選下，Das1號(hào)化合物和Das11號(hào)化合物的體外細(xì)胞水平的IC50值分別為O.073μmol/L和0.117μmol/L。然后我們通過(guò)流式細(xì)胞儀分析檢測(cè)KG-1a細(xì)胞株中細(xì)胞免疫表型CD34+/CD38-，從而得到結(jié)果Das1號(hào)化合物和Das11號(hào)化合物均略抑制了該類(lèi)腫瘤干細(xì)胞的活性，使其凋亡。
　　實(shí)驗(yàn)中，我們還對(duì)化合物庫(kù)的化合物進(jìn)行了篩選，在廣譜篩選的情況下，得到72號(hào)化合物，在肝癌，乳腺癌以及白血病細(xì)胞株中均