泰山松花粉及蘆薈多糖與蜂膠的合劑對免疫雞的免疫增強作用.pdf

1、細菌、病毒病原體引起的動物傳染病發(fā)展趨勢越來越復雜、嚴峻，在控制疾病方面抗生素發(fā)揮著著越來越重要的作用，但是它們的頻繁使用會導致藥物殘留以及耐藥菌株的出現(xiàn)。目前，預防接種疫苗是減少傳染病發(fā)病率的最佳途徑，一般來說，將免疫調節(jié)劑應用在疫苗上，不僅可以增強疫苗的免疫反應，而且能延長免疫增強作用時間。鑒于本實驗室前期的相關研究，來自不同資源的泰山松花粉多糖、蘆薈多糖和蜂膠被證明有良好的免疫調節(jié)功能和類似的免疫增強效果，但是我們尚不清楚當它們聯(lián)

2、合使用時，是否會具有協(xié)同的免疫增強效果？本試驗利用泰山松花粉多糖、蜂膠和蘆薈多糖這三種免疫調節(jié)劑，以它們單獨或混合地應用在免疫禽波氏桿菌滅活苗、新城疫弱毒疫苗的雛雞上作為研究切入點，通過測定體液免疫和細胞免疫相關免疫指標，探討泰山松花粉及蘆薈多糖與蜂膠的合劑對免疫雞的免疫增強效果，篩選出最佳組方，旨在為畜禽業(yè)新一代疫苗佐劑或免疫增強劑的研制開發(fā)提供理論依據(jù)。
　　本研究分為三方面內容:
　　1.植物多糖的提取及測定
　

3、　泰山松花粉多糖和蘆薈多糖由本實驗室改進后的水提醇沉法提取，由苯酚-硫酸法測定多糖含量。該方法泰山松花粉多糖、蘆薈多糖的得率分別為4.93％、2.67％，多糖含量為76.4％、80.4％。
　　2.不同免疫佐劑組方對禽波氏桿菌滅活疫苗的免疫增強作用的研究
　　為研究泰山松花粉及蘆薈多糖與蜂膠的合劑對禽波氏桿菌滅活疫苗的免疫增強效果。將160只3日齡SPF雛雞隨機分為8組，在3、7和12日齡，TPPPS、PP和AP組雛雞分別皮

4、下注射含有泰山松花粉多糖、蜂膠和蘆薈多糖單一免疫佐劑的禽波氏桿菌滅活疫苗;TPPPS-PP、PP-AP、TPPPS-AP組雛雞分別皮下注射內含泰山松花粉多糖和蜂膠合劑、蜂膠和蘆薈多糖合劑、泰山松花粉多糖和蘆薈多糖合劑的禽波氏桿菌滅活疫苗;PBS組雛雞皮下注射等量PBS的禽波氏桿菌滅活疫苗;Mock組雛雞僅皮下注射等量生理鹽水。在免疫后7、14、21、28、35和42天，每組隨機取3份血樣，依次測定血清抗體效價、血液IL-2含量、外周血淋

5、巴細胞轉化率、外周血CD4+、CD8+T淋巴細胞數(shù)量。結果顯示，在14、21、28和35d時TPPPS、PP、TPPPS-PP組各免疫指標高于其他各組，且顯著高于PBS、Mock組(P＜0.05)，在14、21和28d時TPPPS-PP組各指標具有最高水平(P＜0.05)。結果表明，泰山松花粉多糖和蜂膠合劑能誘導禽波氏桿菌滅活疫苗產生最高水平的體液免疫和細胞免疫。因此，泰山松花粉多糖和蜂膠可協(xié)同增強禽波氏桿菌滅活疫苗的免疫效應。

6、　　3.不同免疫增強劑組合對新城疫弱毒疫苗的免疫增強作用的研究
　　為研究泰山松花粉及蘆薈多糖與蜂膠的合劑對新城疫弱毒疫苗的免疫增強效果。將160只1日齡SPF雛雞隨機分為8組，其中7組疫苗組在12日齡用新城疫Ⅳ系疫苗點眼滴鼻首免，且在28日齡肌肉注射二免，在首免的同時，TPPPS、PP、AP組雛雞分別皮下注射泰山松花粉多糖、蜂膠和蘆薈多糖;TPPPS-PP、PP-AP、TPPPS-AP組雛雞分別皮下注射泰山松花粉多糖和蜂膠合劑、

7、蜂膠和蘆薈多糖合劑、泰山松花粉多糖和蘆薈多糖合劑;PBS組雛雞皮下注射等量PBS。MOCK組雛雞僅皮下注射等量生理鹽水。在免疫后7、14、21、28、35和42天，每組隨機取三份血樣，依次測定血清抗體效價、血液IFN-γ含量、外周血淋巴細胞轉化率、外周血CD4+、CD8+T淋巴細胞數(shù)量。結果顯示，在除7d外的所有時間點時7個疫苗組血清抗體水平、IFN-γ含量、淋巴細胞轉化率、外周血中CD4+、CD8+T淋巴細胞數(shù)量均高于MOCK組;在1