益腎清利、和絡泄?jié)岱鼓I臟纖維化的機制與治療2—3期慢性腎臟病的臨床療效評價.pdf

1、目的：腎臟纖維化是慢性腎臟病發(fā)展為慢性腎衰竭的主要原因，慢性腎臟病在發(fā)展為慢性腎衰竭的過程中有一個共同的病理學特點：從纖維化到硬化。腎臟纖維化的病理特征主要表現(xiàn)為細胞外基質(zhì)積聚，腎小球正常結構消失，腎臟功能逐漸喪失直至廢用。導致這種病理變化并最終出現(xiàn)腎功能下降的因素有以下幾個方面：蛋白尿、血脂代謝異常、凝血和血液流變學異常、足細胞損害、腎臟組織及細胞因子的表達和代謝異常。首先，實驗研究以阿霉素腎病大鼠作為實驗對象，通過對實驗動物的蛋白尿

2、、血液生化、血液流變學、足細胞標志蛋白和腎臟組織及細胞因子的動態(tài)檢測，探討益腎清利、和絡泄?jié)岑煼ㄖ委煱⒚顾啬I病大鼠的機制及療效。臨床研究對已經(jīng)接受完善降壓、糾酸、調(diào)脂、改善水電平衡等基礎治療的慢性腎臟病2-3期“腎虛濕瘀證”的患者開展臨床研究，以僅接受基礎治療的慢性腎臟病2-3患者作為對照組，評價以“益腎清利、和絡泄?jié)岱ā睘橹鞯闹嗅t(yī)療法的療效，為進一步深入探討中醫(yī)辨證治療在慢性腎臟病臨床治療中的作用尋求依據(jù)。 方法：實驗研究，參

3、考相關文獻[1-2]，應用阿霉素對SD大鼠尾靜脈進行一次性注射，造成大鼠腎臟產(chǎn)生類似人類慢性腎炎的病理學改變。按照實驗設計將大鼠隨機分為空白對照組、模型組、陰性對照組、中藥治療組、西藥治療組、中藥+西藥治療組。動態(tài)留取大鼠實驗開始后24小時小便標本，測定尿蛋白定量和尿N-酰-B-D-葡萄糖酐酶（NAG）酶；不同時間點測定血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、白蛋白（ALB）、甘油三脂（TG）、膽固醇（CHO）水平。造模后第8周末處死大鼠

4、，取出腎臟組織分別處理，然后應用光學顯微鏡觀察腎臟組織病理學形態(tài)變化，應用免疫組織化學法檢測組織纖維化相關細胞因子如纖維連接蛋白（FN）、基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-9）和膠原Ⅳ（CoⅣ）的含量，應用分子生物學研究方法以及圖象分析技術，分析各組大鼠腎臟組織中TIMP-1、TGF-β1、MMP-9和Nephrin的表達水平。臨床研究，按照美國NKF-K/DOGI工作組制定的《慢性腎臟病及透析的臨床實踐指南Ⅱ》中的診斷標準和中國國家食品和藥品監(jiān)

5、督管理局制定的《中藥新藥臨床指導原則（慢性腎衰竭）》中的診斷標準和治療原則，對多種影響腎臟功能的因素進行臨床監(jiān)測。在控制血壓、糾正水電解質(zhì)紊亂等治療的基礎上，應用以益腎清利、和絡泄?jié)岱樵瓌t辨證論治的中藥方劑，對2-3期慢性腎臟病患者的相關實驗室檢查項目、中醫(yī)癥候積分動態(tài)觀察，對比不同療法的臨床療效。 結果：實驗研究，阿霉素腎病大鼠的中藥治療組尿蛋白含量和尿NAG酶與阿霉素腎病大鼠模型組和西藥治療組比較減輕明顯。實驗結果還提示中

6、藥配合西藥可以調(diào)節(jié)脂代謝，降低膽固醇水平和改善血液流變學情況，使血漿粘度下降。腎臟的病理組織學觀察發(fā)現(xiàn)模型組的腎小球、細胞外基質(zhì)和腎小管間質(zhì)病變明顯。中藥治療組、西藥治療組和中藥+西藥治療組與模型組比較可見上述改變出現(xiàn)不同程度的減輕。免疫組織化學中應用光密度積分定量檢測腎臟組織的組織纖維化相關因子如FN、MMP-9和CoⅣ的含量情況。通過SPSS統(tǒng)計軟件分析表明，各治療組的表達量與模型組之間有明顯差別，提示各組治療藥物可以抑制阿霉素腎病

7、大鼠腎臟細胞外基質(zhì)增生相關的細胞因子的過度表達。我們應用逆轉錄聚合酶鏈式反應（RT-PCR）的方法檢測各組大鼠腎臟組織的TIMP-1、TGF-β1、MMP-9和Nephrin指標的RNA表達情況。各組治療藥物（不含陰性對照組）可以減輕阿霉素腎病大鼠纖維化正相關因子TIMP-1和TGF-β1的表達。中藥+西藥治療組療效明顯優(yōu)于其他各組，差異有顯著性（P<0.05）。腎臟纖維化負相關因子MMP-9和足細胞相關蛋白Nephrin的RNA表達情

8、況提示各組治療藥物（不含陰性對照組）可以保護阿霉素腎病大鼠腎臟足細胞并提高纖維化負相關因子MMP-9的表達量，中藥+西藥治療組療效明顯優(yōu)于其他各治療組，差異有顯著性。 臨床研究病例來源于江蘇省中醫(yī)院和蘇州大學附屬第一醫(yī)院的門診和住院患者，共納入2-3期慢性腎臟病患者90例，其中男性58例，女性32例。收集患者相關的臨床數(shù)據(jù)資料，應用SPSS15.0統(tǒng)計軟件分析。統(tǒng)計分析結果提示，以益腎清利、和絡泄?jié)釣橹委熢瓌t的中藥方劑與西藥基礎

9、治療相配合的中西藥治療組與單純西藥基礎治療組進行比較。結合相關臨床療效指標提示中西藥治療組相比單純西藥治療組，可以降低患者腎臟功能的下降速度，改善患者的癥候，提高患者臨床療效和依從性。 結論：“益腎清利、和絡泄?jié)岱ā钡闹兴幏絼梢詼p少阿霉素腎病大鼠的蛋白尿、降低尿液的NAG酶、減輕腎臟組織細胞外基質(zhì)合成、抑制TIMP、TGF-β1的表達、提高抗組織纖維化因子MMP-9和足細胞標志蛋白（nephrin）的表達。中藥方劑和貝那普利