利魯唑?qū)ξ焖牡掳d癇大鼠海馬CA3區(qū)GFAP、IL-1β及TNF-a的影響.pdf

1、[目的]
　　 采用戊四氮致癲癇大鼠模型，觀察大鼠癲癇發(fā)生發(fā)展過(guò)程中海馬CA3區(qū)神經(jīng)膠質(zhì)酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein，GFAP)及白細(xì)胞介素1β(interleukin-1 beta，IL-1β)、腫瘤壞死因α(tumor necrosis factor alpha，TNF-α)的表達(dá)情況，并應(yīng)用利魯唑給予干預(yù)，觀察其在癲癇的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中對(duì)海馬CA3區(qū)GFAP、IL-1β及TNF-

2、α表達(dá)的影響，以期為探索臨床上治療癲癇疾病的新方法提供分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)和理論依據(jù)，也為尋求癲癇疾病的早期診斷方法提供新的思路。
　　 [方法]
　　 健康雄性Sprague-Dawley，(SD)大鼠60只，隨機(jī)選取45只按35mg/kg·d進(jìn)行腹腔注射戊四氮(Pentylenetetrazol，PTZ)溶液，連續(xù)注射30天，建立SD大鼠癲癇點(diǎn)燃模型。隨機(jī)分三組：對(duì)照組、PTZ組和利魯唑組。藥物利魯唑按10mg/kg·d灌

3、胃治療，另外兩組給予等量生理鹽水灌胃，30天后處死全部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，迅速斷頭取腦，于冰盒上快速分離海馬組織，固定包埋以備實(shí)驗(yàn)。免疫組織化學(xué)法檢測(cè)各組大鼠海馬CA3區(qū)GFAP、IL-1β、TNF-α的表達(dá)和分布，利用計(jì)算機(jī)圖象對(duì)比分析各組大鼠海馬CA3區(qū)GFAP、IL-1β、TNF-α的表達(dá)水平。
　　 [結(jié)果]
　　 1.癲癇大鼠行為學(xué)觀察：造模SD大鼠均出現(xiàn)不同程度的癲癇發(fā)作，造模成功。
　　 2.GFAP免疫組化

4、染色：取海馬CA3區(qū)進(jìn)行圖象對(duì)比分析：GFAP陽(yáng)性細(xì)胞平均光密度值分別是：對(duì)照組0.119±0.0022(OD)；PTZ組0.132±0.0023(OD)；利魯唑組0.126±0.0031(OD)。PTZ組及利魯唑組GFAP陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；PTZ組高于利魯唑組(P<0.05)。
　　 3.IL-1β免疫組化染色：取海馬CA3區(qū)進(jìn)行圖象對(duì)比分析：IL-1β陽(yáng)性細(xì)胞平均光密度值分別是：對(duì)照組0.210±0

5、.0020(OD)；PTZ組0.241±0.0024(OD)；利魯唑組0.220±0.0019(OD)。PTZ組及利魯唑組IL-1β陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；PTZ組高于利魯唑組(P<0.05)。
　　 4.TNF-α免疫組化染色：取海馬CA3區(qū)進(jìn)行圖象對(duì)比分析：TNF-α陽(yáng)性細(xì)胞平均光密度值分別是：對(duì)照組0.191±0.0028(OD)；PTZ組0.230±0.0031(OD)；利魯唑組0.202±0.003

6、1(OD)。PTZ組及利魯唑組TNF-α陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；PTZ組高于利魯唑組(P<0.05)。
　　 5.GFAP、IL-1β、TNF-α表達(dá)的相關(guān)性分析：大鼠海馬CA3區(qū)GFAP與IL-1β表達(dá)水平呈顯著正相關(guān)(n=45，r=0.845，P<0.01)；GFAP與TNF-α表達(dá)水平呈顯著正相關(guān)(n=45，r=0.849，P<0.01)；IL-1β與TNF-α表達(dá)水平呈顯著正相關(guān)(n=45，r=0.9

7、69，P<0.01)。
　　 [結(jié)論]
　　 1.SD大鼠癲癇發(fā)作后，其海馬CA3區(qū)發(fā)生一系列病理學(xué)改變，神經(jīng)元變性、壞死；星形膠質(zhì)細(xì)胞增殖活化，GFAP表達(dá)顯著增高；細(xì)胞因子IL-1β、TNF-α表達(dá)顯著增高。
　　 2.致癲癇SD大鼠海馬CA3區(qū)GFAP與IL-1β的表達(dá)、GFAP與TNF-α表達(dá)及IL-1β與TNF-α表達(dá)均呈顯著正相關(guān)。
　　 3.利魯唑可以減輕SD大鼠癲癇發(fā)作后的海馬CA3區(qū)神經(jīng)