鴨蛋殼膜酶水解及其水解物的分離提取與應(yīng)用技術(shù)研究.pdf

1、本課題主要研究:(1)鴨蛋殼膜酶水解的預處理方法比較;(2)鴨蛋殼膜雙酶水解提取粘多糖工藝研究;(3)鴨蛋殼膜酶水解制備蛋白多肽工藝研究;(4)鴨蛋殼膜酶水解液護膚品研制。
　　分別用熔融尿素法、3-巰基丙酸還原法、硫化鈉還原法來預處理鴨蛋殼膜，以鴨蛋殼膜分解率與D-葡萄糖醛酸提取率為指標衡量水解效果，最終篩選出硫化鈉還原法為最佳的鴨蛋殼膜預處理方法。
　　采用硫化鈉還原法來打開鴨蛋殼膜角蛋白中的二硫鍵，設(shè)計了五因素四水平正

2、交試驗，考察了固液比、十二烷基硫酸鈉用量、氨水用量、時間和硫化鈉用量五個因素。結(jié)果表明:各因素對蛋殼膜二硫鍵打開的效果影響從大到小為固液比＞十二烷基硫酸鈉用量＞氨水用量＞時間＞硫化鈉量，優(yōu)化后的工藝條件為每克蛋殼膜添加十二烷基硫酸鈉0.37g、硫化鈉0.80g，固液比1∶20，氨水占總液比67％，反應(yīng)時間3.5h。
　　采用還原-雙酶解法水解鴨蛋殼膜提取粘多糖，通過二次回歸正交旋轉(zhuǎn)組合試驗探索了雙酶水解的酶用量、雙酶比例、總水解時

3、間三個因素對粘多糖得率的影響，得到最佳條件為:堿性蛋白酶與胰蛋白酶比例0.10678，水解總時間15.364h，酶總用量66820u/g。在此條件下進行驗證試驗，D-葡萄糖醛酸得率為6.75mg/g，與理論極值為6.90mg/g接近。
　　采用還原-酶解法水解鴨蛋殼膜制備蛋白多肽，設(shè)計了三因素三水平正交試驗，考察了時間、固液比、酶量三個因素。結(jié)果表明:在試驗范圍內(nèi)三個因素三個水平的氮得率均在92％左右且差異不大，三個因素的變化對氮

4、得率的影響都很小;三種因素對多肽含量的影響從大到小依次是時間＞固液比＞酶量;三種因素對氨基酸含量影響從大到小依次是酶量＞時間＞固液比。最佳條件為反應(yīng)時間6h，固液比1∶15，酶用量20000u/g，在此條件下鴨蛋殼膜水解液的氮得率約92％，產(chǎn)物多肽中分子量屬于活性多肽的占90％以上。
　　用制得的鴨蛋殼膜水解液制作護膚品，設(shè)計了三因素三水平正交試驗，考察了鴨蛋殼膜水解液用量、丙三醇用量、聚乙烯吡咯烷酮用量三個因素。結(jié)果表明:三個因