以核蛋白為靶標(biāo)的新型流感病毒抑制劑的設(shè)計(jì)、合成與活性研究.pdf

1、流行性感冒（流感）是一種嚴(yán)重威脅人類(lèi)生命健康的呼吸道傳染病，流感大流行已對(duì)社會(huì)和經(jīng)濟(jì)造成了嚴(yán)重的后果。隨著流感病毒的變異，宿主范圍的擴(kuò)大，高致病性禽流感威脅的日益增強(qiáng)，流感的預(yù)防和治療已成為人類(lèi)社會(huì)高度關(guān)注的公共衛(wèi)生問(wèn)題。
　　 流感疫苗可以有效的預(yù)防和控制流感傳播?？沽鞲胁《靖腥舅幬?，包括M2離子通道阻滯劑和神經(jīng)氨酸酶抑制劑，也可以用來(lái)預(yù)防和治療流感。然而疫苗與現(xiàn)有的抗流感病毒藥物均具有各自的缺點(diǎn)與不足，使它們的應(yīng)用受到了各種

2、限制。作為流感的致病因子，流感病毒通過(guò)抗原漂移和抗原轉(zhuǎn)變等方式對(duì)疫苗與抗流感藥物的敏感性降低，使藥物的耐藥性問(wèn)題日益突出。因此，開(kāi)發(fā)新的抗流感病毒藥物是一項(xiàng)非常緊迫的任務(wù)。
　　 流感病毒核蛋白是高度保守的結(jié)構(gòu)蛋白，在流感病毒的復(fù)制周期中起著關(guān)鍵性的作用，是流感病毒與宿主細(xì)胞相互作用的關(guān)鍵銜接分子，這使核蛋白成為抗流感病毒藥物研發(fā)過(guò)程中非常有潛力的靶點(diǎn)。研究證實(shí)以核蛋白為靶點(diǎn)設(shè)計(jì)抗流感病毒藥物是可行的，基于流感病毒核蛋白的藥物設(shè)

3、計(jì)與開(kāi)發(fā)已成為抗流感病毒藥物研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)之一。
　　 3-巰基-1，2，4-三氮唑衍生物是通過(guò)虛擬藥物篩選發(fā)現(xiàn)的流感病毒核蛋白抑制劑。體外實(shí)驗(yàn)表明該類(lèi)化合物對(duì)多種流感病毒株具有較好的抑制活性，其中包括耐金剛乙胺的A/California/07/2009(H1N1)病毒株。在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，該類(lèi)化合物也具有較好的預(yù)防和治療效果。因此以該類(lèi)化合物為先導(dǎo)化合物通過(guò)進(jìn)一步結(jié)構(gòu)優(yōu)化，發(fā)現(xiàn)新一代高效抗流感病毒核蛋白抑制劑具有重要的意義。

4、>　　 本課題利用生物電子等排體藥物設(shè)計(jì)策略，以3-巰基-1，2，4-三氮唑衍生物為先導(dǎo)化合物，設(shè)計(jì)并合成了吡唑氧乙酰腙衍生物和吡唑氧乙酰肼衍生物2個(gè)系列化合物。吡唑氧乙酰腙類(lèi)化合物的合成以對(duì)甲基苯乙酸為起始原料，經(jīng)過(guò)酯化反應(yīng)、親核加成-消除反應(yīng)，環(huán)合反應(yīng)得到羥基吡唑，再經(jīng)過(guò)親核取代、肼解生成中間體吡唑氧乙酰肼，最后經(jīng)親核加成反應(yīng)，生成21個(gè)目標(biāo)化合物(S6A-01～S6A-21)。吡唑氧乙酰肼類(lèi)9個(gè)化合物(SB-01～SB-09)由

5、中間體吡唑氧乙酰肼經(jīng)親核加成-消除反應(yīng)生成。30個(gè)目標(biāo)化合物均未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道，其結(jié)構(gòu)經(jīng)質(zhì)譜、紅外光譜和核磁共振氫譜分析確證。
　　 應(yīng)用細(xì)胞病變法與中性紅染色法對(duì)吡唑氧乙酰腙類(lèi)化合物進(jìn)行了初步的體外抗流感病毒活性實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明大部分化合物都具有不同程度抑制流感病毒復(fù)制的活性。有8個(gè)化合物的活性優(yōu)于金剛烷胺，其中S6A-07和S6A-19是活性最好的化合物。它們的EC50值分別是7.98μM和6.89μM，大約是金剛烷胺的4倍。然而

6、這些化合物的細(xì)胞毒性較大，選擇系數(shù)小于金剛烷胺。此外，本課題還對(duì)吡唑氧乙酰腙類(lèi)化合物進(jìn)行了抗HIV活性測(cè)試，但該系列化合物均未顯示出抗HIV活性。目前吡唑氧乙酰肼類(lèi)化合物的抗流感病毒活性測(cè)試正在進(jìn)行中。
　　 總之，本論文運(yùn)用生物電子等排體藥物設(shè)計(jì)策略對(duì)3-巰基-1，2，4-三氮唑類(lèi)核蛋白抑制劑進(jìn)行了結(jié)構(gòu)改造，設(shè)計(jì)合成了吡唑氧乙酰腙類(lèi)和吡唑氧乙酰肼類(lèi)2個(gè)系列共30個(gè)結(jié)構(gòu)全新的目標(biāo)化合物，其結(jié)構(gòu)均經(jīng)光譜分析確證。體外抗流感病毒活性