暗紋東方鲀大規(guī)模家系構(gòu)建及兩種東方鲀卵質(zhì)評(píng)估.pdf

1、暗紋東方鲀(Takifugu obscurus)、紅鰭東方鲀(Takifugu rubripes)均為東方鲀屬(Takfugu)，為國內(nèi)重要的養(yǎng)殖型經(jīng)濟(jì)魚類，但暗紋東方鲀家系構(gòu)建的早期標(biāo)準(zhǔn)化培育方法尚未建立，且作為影響其家系構(gòu)建早期培育階段成敗的重要因素，暗紋東方鲀、紅鰭東方鲀卵子的質(zhì)量評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)也亦未建立。為創(chuàng)建暗紋東方鲀家系的早期標(biāo)準(zhǔn)化培育方法，研究暗紋東方鲀卵子可發(fā)育能力與其生化指標(biāo)的關(guān)系，探究紅鰭東方鲀卵子生理生化變化及對(duì)其卵質(zhì)影

2、響，找出本文做了三部分工作，簡要如下:
　　1.暗紋東方鲀家系構(gòu)建與早期標(biāo)準(zhǔn)化培育
　　采用人工授精和家系構(gòu)建技術(shù)，對(duì)暗紋東方鲀?nèi)蚁禈?gòu)建與標(biāo)準(zhǔn)化培育技術(shù)進(jìn)行探索。按照1雄配1雌的原則，選取廣州、江蘇和上海3個(gè)群體的暗紋東方鲀親魚進(jìn)行育熟與定向交配，并對(duì)暗紋東方鲀?cè)缙谏L階段子稚魚進(jìn)行了環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)化和一、二、三、四級(jí)數(shù)量標(biāo)準(zhǔn)化培育。結(jié)果顯示，在受精及孵化階段，暗紋東方鲀親魚總體產(chǎn)卵量大，多集中在250-350g，但有5個(gè)家

3、系產(chǎn)卵量不足200g，將其淘汰;家系間初孵仔魚數(shù)在0.5-14萬尾不等，家系間差異較大，有6個(gè)家系因初孵仔魚數(shù)低于5萬而被淘汰。從4次數(shù)量標(biāo)準(zhǔn)化結(jié)果看，一級(jí)數(shù)量標(biāo)準(zhǔn)化后，有66個(gè)家系存活率不低于80％，且僅有1個(gè)家系成活率不足50％而遭淘汰;二級(jí)數(shù)量標(biāo)準(zhǔn)化后，各家系存活率普遍高于70％，僅有3個(gè)家系存活率不足70％而被淘汰;三級(jí)數(shù)量標(biāo)準(zhǔn)化后，全部家系的稚魚存活率均在70％以上，且在80％以下的僅有2個(gè)家系，并將其淘汰;四級(jí)數(shù)量標(biāo)準(zhǔn)化后，

4、各家系幼魚存活率均在80％以上，其中有42個(gè)家系存活率高于90％。由此可知，各階段絕大多數(shù)家系的成活率保持在較高水平，4次數(shù)量標(biāo)準(zhǔn)化后，成功構(gòu)建了82個(gè)全同胞家系。結(jié)果表明，暗紋東方鲀較大的產(chǎn)卵量對(duì)構(gòu)建全同胞家系有利，人工授精前準(zhǔn)備數(shù)量充足的親魚也尤為重要此外，在早期階段家系構(gòu)建和培育階段，保持家系間同步性可較好降低家系間環(huán)境差異帶來的影響。文章對(duì)暗紋東方鲀家系構(gòu)建中的問題進(jìn)行了探討，可為大規(guī)模建立暗紋東方鲀家系提供一定借鑒。
　

5、　2.暗紋東方鲀卵子磷酸酶等生化指標(biāo)分析與卵質(zhì)評(píng)估
　　用生化分析方法對(duì)暗紋東方鲀未受精卵子基本成分、磷酸酶活力、蘋果酸脫氫酶活力、唾液酸、氨基酸含量進(jìn)行分析，同時(shí)用GC-MS方法對(duì)脂肪酸組成及相對(duì)含量進(jìn)行檢測，并對(duì)各物質(zhì)變化規(guī)律與其孵化率的相關(guān)性進(jìn)行分析。結(jié)果顯示，酸性磷酸酶活力、唾液酸含量與孵化率顯著相關(guān)(P＜0.05，R12=0.501，R22=0.406)，堿性磷酸酶與孵化率顯著負(fù)相關(guān)(P＜0.05，R2=0.690);C

6、14∶0與孵化率顯著相關(guān)(P＜0.05，R2=0.684)，并呈現(xiàn)遞減趨勢;ARA、DHA與孵化率均顯著相關(guān)(P＜0.05，R12=0.447，R22=0.710)，并呈現(xiàn)先遞增后遞減的變化趨勢;n-3脂肪酸、DHA與EPA之比均與孵化率存在顯著相關(guān)(P＜0.05，R12=0.509，R22=0.722，R32=0.550)。結(jié)果表明，磷酸酶、唾液酸、脂肪酸等物質(zhì)變化規(guī)律與卵子孵化率存在相關(guān)性，且ACP活力值在[68.045，141.0

7、38]范圍時(shí)，AKP活力值在[2.298，7.241]范圍時(shí)，SA含量在[9.081，19.973]范圍時(shí)，C14∶0含量在[0.485，0.658]范圍時(shí)，ARA含量在[1.371，2.498]范圍時(shí)，DHA含量在[13.838，18.469]范圍時(shí)，均可作為卵子孵化率不低于50％的參考指標(biāo)，據(jù)此可在一定程度上反應(yīng)出暗紋東方鲀苗種繁育生產(chǎn)中所用卵子的可孵化價(jià)值，亦可作為參考指標(biāo)對(duì)其卵子質(zhì)量進(jìn)行初步、客觀評(píng)價(jià)。
　　3.紅鰭東方鲀

8、卵子生理生化分析與質(zhì)量評(píng)估
　　人為對(duì)性成熟親魚各推遲一周、兩周擠卵，并與正常組作比較，研究其推遲產(chǎn)卵后卵子內(nèi)磷酸酶、蘋果酸脫氫酶、脂肪酸等生化參數(shù)變化規(guī)律及其與受精率的相關(guān)性。結(jié)果顯示，推遲一周產(chǎn)卵后，B卵子組受精率顯著下降（P＜0.05），兩周后，C組受精率降至31.89％;卵內(nèi)酸性磷酸酶活力隨產(chǎn)卵期推遲而顯著下降(P＜0.05)，并與受精率存在顯著正相關(guān)(R2=0.705，P＜0.05);正常排卵A組蘋果酸脫氫酶活力顯著高于

9、B、C兩組(P＜0.05)，總氨基酸含量亦存在相似變化趨勢，A、B組顯著高于C組(P＜0.05);此外C14∶0、C15∶0、C16∶0、C16∶ln-7、C18∶3n-3、C20∶5n-3在總脂中比例均在正常組中最高，并與受精率存在顯著正相關(guān)(P＜0.05);C22∶5n-3、DHA∶EPA均與受精率呈顯著負(fù)相關(guān)(P＜0.05)。結(jié)果表明，酸性磷酸酶、蘋果酸脫氫酶、總氨基酸及多種脂肪酸可在一定程度反應(yīng)紅鰭東方鲀卵子過熟與否，亦可作為參