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1、目的:1)建立鼻咽癌耐藥細(xì)胞系的合適的保存條件。2)了解細(xì)胞色素P450家族在鼻咽癌紫杉醇敏感細(xì)胞(CNE1)和耐藥細(xì)胞(CNE1/Taxo)中是否有表達(dá),其表達(dá)是否具差異性。 方法:1.用集落形成試驗(yàn)檢測(cè)CNE1和CNE1/Taxol對(duì)紫杉醇的半數(shù)抑制量(IC50)及其耐藥指數(shù)(RI),驗(yàn)證已建立的耐藥細(xì)胞株的耐藥性;2.用慢速凍存法和快速凍存法保存細(xì)胞,用細(xì)胞計(jì)數(shù)法觀察復(fù)蘇后鼻咽癌耐藥細(xì)胞系生存率的差異。3.用cDNA mi
2、croarray實(shí)驗(yàn)大規(guī)模的檢測(cè)CNE1/Taxol和CNEl的P450表達(dá)。4.運(yùn)用GCOS和Dchip軟件分析芯片數(shù)據(jù),明確在CNE1和CNE1/Taxol中P450的表達(dá)變化。 結(jié)果:1.快速凍存法保存的細(xì)胞復(fù)蘇后生存率明顯高于慢速凍存法;2.基因芯片的分析結(jié)果顯示,p450家族的53個(gè)成員中,9個(gè)成員在鼻咽癌細(xì)胞系中表達(dá)。與親本鼻咽癌細(xì)胞系比較,抵抗細(xì)胞系中的表達(dá)顯著增強(qiáng)的基因有5個(gè),即CYP1A1、CYP2R1、CYP
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