5C5分化抗原功能的探索.pdf

1、5C5分化抗原是本實(shí)驗(yàn)室從人B細(xì)胞株3D5克隆到的,由人cDNA編碼,它表達(dá)于3D5細(xì)胞的胞膜,但功能不明.為了更深入了解5C5分化抗原的功能,本論文工作分別用酵母雙雜技術(shù)和基因芯片技術(shù)做了如下的研究:1)在酵母菌中構(gòu)建了用于酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)的3D5細(xì)胞cDNA文庫(kù),用酵母雙雜交技術(shù)從文庫(kù)中釣取了46個(gè)陽(yáng)性克隆.在排除假陽(yáng)性及未知功能的蛋白質(zhì)后,選擇肌球蛋白作了進(jìn)一步的驗(yàn)證.免疫共沉淀及GST-PULLDOWN試驗(yàn)均證實(shí)了5C5分子與肌球

2、蛋白間存在相互作用.2)用含有4097個(gè)基因(包括原癌基因和抑癌基因、離子通道和運(yùn)輸?shù)鞍?、?xì)胞周期蛋白類、外壓反應(yīng)蛋白、細(xì)胞骨架和運(yùn)動(dòng)、細(xì)胞凋亡相關(guān)的蛋白、DNA合成和修復(fù)和重組蛋白、DNA結(jié)合和轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)錄因子、細(xì)胞受體、免疫相關(guān)、細(xì)胞信號(hào)和傳遞蛋白、代謝、蛋白翻譯合成、發(fā)育相關(guān)、其它)的芯片所作的分析顯示,與5C5分化抗原表達(dá)正常的野生型細(xì)胞(W)相比,5C5分化抗原表達(dá)抑制的3D5細(xì)胞(AS)中有30個(gè)基因的表達(dá)下調(diào),它們涉及干擾素