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文檔簡介
1、目的:傳統(tǒng)認(rèn)為小腦是皮層下的軀體性運(yùn)動(dòng)控制中樞,但近年來的研究資料表明,小腦不僅具有經(jīng)典的軀體性運(yùn)動(dòng)調(diào)節(jié)功能,還參與了非軀體性活動(dòng)的調(diào)節(jié)。本研究旨在探討刺激小腦頂核在減輕大鼠胃缺血-再灌注損傷中的作用及其調(diào)控機(jī)制。
方法:本實(shí)驗(yàn)采用健康Sprague-Dawley大鼠,采用化學(xué)刺激(注射L-Glu)、電刺激以及夾閉大鼠腹腔動(dòng)脈30 min,松開動(dòng)脈夾血流復(fù)灌1 h的胃缺血-再灌注(gastric ischemia-repe
2、rfusion,GI-R)模型,觀察了FN注射一定劑量L-谷氨酸(L-Glu)對(duì)大鼠GI-R后胃黏膜損傷指數(shù)和細(xì)胞增殖凋亡相關(guān)因子的表達(dá)變化;進(jìn)一步采用損毀小腦上腳交叉(XSCP)、下丘腦外側(cè)區(qū)(LHA)、下丘腦室旁核(PVN)、切斷膈下迷走神經(jīng)或切除腹腔交感神經(jīng)節(jié)及應(yīng)用受體阻斷劑、激動(dòng)劑,觀察了其他相關(guān)核團(tuán)、外周神經(jīng)以及抑制性神經(jīng)遞質(zhì)GABA在FN刺激減輕大鼠GI-R損傷中的作用;最后運(yùn)用免疫組化及免疫印跡等實(shí)驗(yàn)技術(shù),觀察了Fas,F
3、asL蛋白在刺激FN對(duì)大鼠GI-R損傷的保護(hù)效應(yīng)中的表達(dá)變化。
結(jié)果:
(1)電、化學(xué)刺激小腦FN,使GI-R損傷顯著減輕,且有強(qiáng)度和劑量-效應(yīng)依賴關(guān)系;
(2)刺激小腦FN,使胃黏膜細(xì)胞的凋亡率降低,增殖率升高;
(3)事先化學(xué)損毀小腦FN,然后對(duì)其再行刺激,則可消除對(duì)GI-R損傷減輕的作用;
(4)刺激小腦FN,使內(nèi)臟大神經(jīng)放電頻率減少和放電幅度降低;化學(xué)損毀雙側(cè)
4、下丘腦外側(cè)區(qū)(lateral hypothalamic area,LHA),再刺激FN,內(nèi)臟大神經(jīng)的放電頻率、幅度都無明顯變化,與刺激FN前相比,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;
(5)化學(xué)損毀雙側(cè)LHA能取消刺激小腦FN對(duì)大鼠GI-R損傷的減輕作用;
(6)刺激小腦FN使缺血-再灌注的胃黏膜的超氧化物歧化酶(SOD)活性升高、丙二醛(MDA)含量降低;
(7)事先FN內(nèi)注射GABA合成標(biāo)志酶.谷氨酸脫羧酶抑
5、制劑3-MP或LHA內(nèi)注射GABAAR拮抗劑bicucullin methbromide能取消刺激小腦FN對(duì)大鼠GI-R損傷的減輕作用;
(8)事先LHA內(nèi)注射GABAAR激動(dòng)劑muscimol能加強(qiáng)刺激小腦FN對(duì)GI-R損傷的減輕作用;
(9)LHA內(nèi)單獨(dú)注射GABA能減輕GI-R損傷;
(10)刺激小腦FN能夠增加再灌注不同時(shí)間點(diǎn)的GMBF:
(11)刺激小腦FN能明顯降低胃缺
6、血.再灌注不同時(shí)間點(diǎn)Fas蛋白的表達(dá)水平,而對(duì)FasL蛋白的表達(dá)變化無明顯影響。
結(jié)論:刺激小腦FN對(duì)大鼠GI-R損傷有保護(hù)作用;該保護(hù)作用是由FN釋放抑制性氨基酸GABA,作用于IMA神經(jīng)元胞膜上的GABAAR,促使交感神經(jīng)的下傳沖動(dòng)減少,支配胃的血流量增多所致:GMBF的增多直接或間接地促進(jìn)了胃黏膜細(xì)胞的增殖,抑制了胃黏膜細(xì)胞的凋亡,同時(shí)增強(qiáng)了胃黏膜細(xì)胞的抗氧化能力,從而減輕胃黏膜的損傷;此外,刺激FN減輕大鼠GI-R
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