甲狀腺功能紊亂時(shí)ghrelin和瘦素的改變及意義的研究.pdf

1、Ghrelin，是近年來在大鼠胃中發(fā)現(xiàn)的新的促進(jìn)生長激素(growthhormone，GH)釋放的?；模瞧駷橹刮ㄒ辉隗w內(nèi)發(fā)現(xiàn)的生長激素釋放激素受體(secretagoguereceptor，GHS-R)的天然配體。它可以在垂體前葉通過與GHS-R結(jié)合，刺激GH的釋放。現(xiàn)已在人和大鼠的胃中發(fā)現(xiàn)了Ghrelin及它的信使RNA(mRNA)，但它的細(xì)胞來源目前還不很明確。通過免疫熒光顯微鏡，人們已經(jīng)在人和大鼠的胃腸道內(nèi)發(fā)現(xiàn)了分泌Ghr

2、elin的細(xì)胞。 ghrelin免疫反應(yīng)性細(xì)胞不是類腸嗜鉻樣細(xì)胞，也不是D細(xì)胞和腸嗜鉻樣細(xì)胞，它在人和大鼠的泌酸腺體的內(nèi)分泌細(xì)胞中占了20％。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)大鼠的ghrelin在X/A樣細(xì)胞內(nèi)有表達(dá)。X/A樣細(xì)胞是電子致密的圓形細(xì)胞，它所分泌的其他激素及其生理功能目前還不明了。ghrelin分泌細(xì)胞(ghrelin細(xì)胞)的定位及其整體和超微結(jié)構(gòu)特征都顯示是X/A樣細(xì)胞。Ghrelin還在人和大鼠的腸道內(nèi)分泌細(xì)胞中有表達(dá)。

3、Ghrelin可能在胃腸道中有許多重要功能，如調(diào)控腸道動(dòng)力學(xué)、胃酸的分泌、腸道上皮細(xì)胞的更新等，這些都是需要進(jìn)一步研究的領(lǐng)域。檢測在不同生理和病理狀態(tài)下胃腸道中g(shù)hrelin的蛋白表達(dá)量及它的mRNA表達(dá)量將提供更多關(guān)于ghrelin的信息，如它的生物合成機(jī)制、分泌機(jī)制、調(diào)控機(jī)制等。 Ghrelin有強(qiáng)大的促生長激素分泌的作用。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，Ghrelin的功用遠(yuǎn)不止如此，它還有許多其它不依賴于促生長激素釋放作用的病理生理作用，如

4、刺激催乳素細(xì)胞和促腎上腺皮質(zhì)激素細(xì)胞的作用；影響垂體性腺功能；調(diào)節(jié)食欲、維持能量平衡；影響睡眠和行為；調(diào)控胃能動(dòng)性和胃酸分泌；影響胰腺的內(nèi)外功能和糖代謝；影響心血管系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)功能及腫瘤細(xì)胞的增殖轉(zhuǎn)化。Ghrelin的發(fā)現(xiàn)開啟了神經(jīng)內(nèi)分泌學(xué)、新陳代謝、胃腸內(nèi)科學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)和心臟病學(xué)的新的研究領(lǐng)域。Ghrelin和/或GHS類似物在不同的生理活動(dòng)中起協(xié)同或拮抗作用，提示可能其有明顯的臨床影響，越來越受到關(guān)注。我們發(fā)現(xiàn)Ghrelin

5、在人類多種疾病中發(fā)揮作用。Ghrelin在許多方面的探討僅是初步的，有待于進(jìn)一步深入全面的研究。 瘦素是由肥胖基因(ob)編碼、脂肪細(xì)胞產(chǎn)生的蛋白質(zhì)類激素，具有廣泛的生物學(xué)效應(yīng)?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)瘦素與神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)之間組成了一個(gè)雙向閉合環(huán)路，一方面它作用于下丘腦、胰腺、腎上腺、甲狀腺、性腺發(fā)揮調(diào)節(jié)功能；另一方面，又受這些神經(jīng)內(nèi)分泌器官的負(fù)反饋調(diào)節(jié)，表現(xiàn)出許多重要生理功能。許多研究表明瘦素與其它調(diào)節(jié)代謝平衡和飲食行為的激素之間可能存在一定

6、的關(guān)系，下丘腦-垂體-甲狀腺軸可能影響瘦素的分泌和代謝。 本文旨在通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床研究探討大鼠各組織中g(shù)hrelin的表達(dá)，ghrelin、瘦素和甲狀腺素的相關(guān)性，以及甲狀腺功能紊亂時(shí)甲狀腺激素對ghrelin和瘦素水平的影響。 第一部分Ghrelin在正常大鼠不同組織中的表達(dá)的研究 目的:探討ghrelin在正常大鼠不同組織中的表達(dá)。 方法:采用免疫印跡技術(shù)(western-blot)和逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈

7、反應(yīng)(RT-PCR)方法檢測大鼠胃、腦、肝、腎、脾、胰、脂肪、肌肉、心肌、十二指腸、空腸、回腸、淋巴結(jié)、睪丸、腎上腺、甲狀腺、肺中g(shù)hrelin的表達(dá)水平。 結(jié)果:正常大鼠胃、十二指腸、空腸、回腸、腦、肝、腎、脾、胰、脂肪、肌肉、淋巴結(jié)、睪丸、腎上腺、甲狀腺、肺中都有g(shù)hrelin的表達(dá)，但心肌內(nèi)沒有檢測到ghrelin的表達(dá)。 結(jié)論:ghrelin廣泛分布于大鼠的各個(gè)組織中，并在不同組織中具有表達(dá)差異，其中以胃的表達(dá)量

8、最多，提示可能具有多種生物學(xué)功能。 第二部分正常大鼠體內(nèi)ghrelin、瘦素和甲狀腺素相關(guān)性的研究 目的:探討正常大鼠體內(nèi)ghrelin、瘦素、甲狀腺激素及與體重的相關(guān)性。 方法:采用放射免疫方法檢測正常大鼠血清ghrelin、瘦素、T3、T4和TSH的水平，并檢測大鼠體重。 結(jié)果:正常大鼠血ghrelin與體重呈負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為-0.87(P=0.0014)，而瘦素與體重呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.78

9、(P=0.0076)；大鼠血清ghrelin與瘦素及甲狀腺激素(T3、T4)分別呈負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為-0.76(P=0.0092)、-0.79(P=0.0073)、-0.69(P=0.0237)，與TSH呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.67(P=0.0355)，而瘦素與甲狀腺激素(T3，T4)成正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.66(P=0.0399)和0.68(P=0.0281)，與TSH呈負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為-0.86(P=0.0020)。

10、結(jié)論:ghrelin與體重、瘦素和甲狀腺激素代謝密切相關(guān)，可作為一個(gè)很好的營養(yǎng)指數(shù)。 第三部分甲狀腺功能紊亂時(shí)ghrelin、瘦素血清、蛋白及mRNA水平改變及其意義的研究 目的:下丘腦-垂體-甲狀腺軸可能影響瘦素和ghrelin的分泌和代謝。本研究旨在探討甲狀腺功能減低和甲狀腺功能亢進(jìn)時(shí)甲狀腺激素對血清瘦素、ghrelin水平，以及脂肪瘦素和胃的ghrelin蛋白和mRNA水平的影響及其意義。 方法:

11、 1.應(yīng)用他巴唑和優(yōu)甲樂人工造成大鼠甲狀腺功能減低和甲狀腺功能亢進(jìn)狀態(tài)，分別于用藥10天、停藥10天檢測用藥組、停藥組和正常對照大鼠血清瘦素、ghrelin、T3、T4、TSH濃度、體重、胃ghrelin和脂肪瘦素的蛋白和mRNA水平。 2.臨床檢測15例甲狀腺功能低下患兒和10例甲狀腺功能亢進(jìn)患兒治療前后血清ghrelin、瘦素、T3、T4、TSH濃度和體塊指數(shù)(BMI)，同期檢測10例正常兒童的上述各項(xiàng)指標(biāo)作對照。

12、結(jié)果: 1.甲減用藥組、甲亢用藥組和正常對照組大鼠血清瘦素與體重均有相關(guān)性(P均＜0.05)，相關(guān)系數(shù)分別0.83、0.82、0.78，ghrelin與體重成負(fù)相關(guān)性，相關(guān)系數(shù)分別-0.81、-0.89、-0.87(P均＜0.05)；去除體重因素，甲亢用藥組、停藥組血清瘦素和脂肪瘦素蛋白和mRNA水平和正常對照組相比無明顯差別(P＞0.05)，而甲減用藥組血清瘦素(1.18±0.24ng/ml)和脂肪瘦素mRNA水平(0.36±

13、0.12)顯著低于停藥組(1.88±0.27ng/ml)、(0.91±0.12)和正常對照組(2.12±0.15ng/ml)、(0.87±0.15)(P均＜0.05)，瘦素蛋白表達(dá)水平也有同樣的改變；而甲亢用藥組血清ghrelin(64.70±9.57pg/ml)顯著低于停藥組(137.80±22.68Pg/ml)和正常對照組(140.40±13.62pg/ml)(P均＜0.05)，甲減組(255.90±27.50pg/ml)則顯著升高

14、(P＜0.05)，蛋白和mRNA的改變趨勢相同。2.臨床觀察甲亢組、甲低組和正常對照組中，ghrelin與BMI均有負(fù)相關(guān)(P＜0.05)，相關(guān)系數(shù)分別為-0.68、-0.69、-0.91；瘦素與BMI均正相關(guān)(P＜0.05)，相關(guān)系數(shù)分別為0.78、0.72、0.74；在年齡、性別和BMI均相匹配的情況下，甲亢組血清ghrelin(1022.00±112.42)pg/ml顯著低于正常對照組(1783.00±141.11)pg/ml(P

15、＜0.05)，甲低組治療前血清ghrelin(2496.67±243.51)pg/m顯著高于正常對照組(P＜0.05)；甲低組瘦素水平(0.4±0.31)ng/ml顯著低于甲亢組(2.55±0.37)ng/mi和正常對照組(2.01±0.25)ng/ml(P均＜0.05)，用左旋甲狀腺素片治療使甲狀腺功能恢復(fù)到正常后，血清瘦素水平升高至(1.77±0.25)ng/ml，達(dá)到正常水平；甲亢組治療前瘦素水平與治療后(2.17±0.21)ng