肺癌相關(guān)蛋白的表達(dá)和候選標(biāo)志物TPX2的初步研究.pdf

1、肺癌是我國城市人群中發(fā)病率最高的惡性腫瘤，其死亡率在惡性腫瘤中排在首位。肺癌的發(fā)生和發(fā)展涉及多基因多階段的改變，研究這些變化對闡明肺癌發(fā)病機(jī)制有重要意義。 本研究基于本實(shí)驗(yàn)室前期轉(zhuǎn)錄組學(xué)和蛋白組學(xué)研究的工作，通過對多種肺癌相關(guān)蛋白(14-3-3、CD98、Fascin、AuroraA、IQGAP1、BAZ1A、PSR和TPX2)的免疫組織化學(xué)染色，在肺癌組織微陣列中進(jìn)行驗(yàn)證，判斷它們在正常和腫瘤中的表達(dá)差異。 另一方面，

2、著重對TPX2在細(xì)胞和人體組織切片中mRNA和蛋白的表達(dá)定位和表達(dá)量進(jìn)行深入研究，比較TPX2在正常組織、不同階段的癌前病變、腫瘤組織和轉(zhuǎn)移灶中表達(dá)標(biāo)記指數(shù)的改變，分析其與腫瘤分化、分期、轉(zhuǎn)移和預(yù)后的相關(guān)性；并通過體外實(shí)驗(yàn)對TPX2影響細(xì)胞周期和細(xì)胞形態(tài)的改變做了初步探討。TPX2的功能研究可能為尋找腫瘤標(biāo)志物提供幫助。 研究發(fā)現(xiàn)肺癌相關(guān)蛋白中在肺腫瘤組織中表達(dá)明顯高于正常對照組織的包括14-3-3β、CD98、Fascin、A

3、uroraA、IQGAP1、BAZ1A、PSR和TPX2，只有Fascin在正常血管和腫瘤血管表達(dá)無顯著性差異。在腫瘤轉(zhuǎn)移灶和原發(fā)灶表達(dá)存在差異的為14-3-3β、CD98、IQGAP1和TPX2。與分化相關(guān)的為Fascin(在上皮組織)、IQGAP1、BAZ1A、PSR和TPX2。與分期相關(guān)的為14-3-3β和TPX2。對淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有影響的包括：14-3-3β為肺鱗癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的保護(hù)性因素，TPX2為肺鱗癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的危險因素。

4、 基于TPX2在正常和腫瘤組織組織表達(dá)改變的差異，進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)TPX2表達(dá)受細(xì)胞周期的嚴(yán)格調(diào)控，在G1-S交界期開始表達(dá)，在胞質(zhì)分裂完成后消失。在S和G2期，TPX2彌漫分布在整個細(xì)胞核，而在分裂期則位于紡錘體上，隨病變惡性程度加劇，從正常支氣管和肺泡到鱗狀化生，不典型增生，原位癌，侵襲癌及轉(zhuǎn)移癌表達(dá)率依次升高；并且可能作為肺鱗癌患者的預(yù)后評價指標(biāo)。 綜合體外實(shí)驗(yàn)和組織表達(dá)狀況，提示TPX2的表達(dá)呈周期性改變并影響細(xì)胞形態(tài)，因此

5、對TPX2的表達(dá)不能以有或無來判定，而應(yīng)以一個比較合適的界限點(diǎn)來判定它表達(dá)的高低。以TPX2表達(dá)標(biāo)記指數(shù)在10％為判別界限點(diǎn)，用于評價肺癌患者癌前病變的階段、轉(zhuǎn)移的發(fā)生和患者的預(yù)后。 綜合流式細(xì)胞術(shù)和熒光顯微鏡下的形態(tài)，外源TPX2在腫瘤細(xì)胞的高表達(dá)使細(xì)胞積聚在G2-M期，而且細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變，出現(xiàn)異常核分裂，絕大多數(shù)細(xì)胞體積增大，與在人體組織中的腫瘤細(xì)胞隨惡性程度的增加異型性更明顯的形態(tài)改變相一致。提示作為紡錘體形成中精確時空