番茄紅素對腦缺血再灌注大鼠氧化應激及缺氧損傷的影響.pdf

1、目的：腦卒中是人類致殘和死亡的重要原因之一，大量研究表明，氧化應激在腦缺血后神經元的繼發(fā)損傷中起到了關鍵作用。番茄紅素(lycopene，LP)是膳食中的一種抗氧化成分。近年來，LP對心腦血管的保護作用越來越受到關注。本研究旨在從氧化應激和缺氧損傷兩個方面觀察番茄紅素對腦缺血再灌注大鼠腦組織的保護作用并探討其可能機理。
　　方法：
　　1.大鼠大腦中動脈栓塞(middle cerebral artery occlusion，

2、MCAO)模型的建立
　　260-280g雄性健康SD大鼠20只，按體重隨機分成4組，每組5只。制作模型時A、B、C、D組插入的栓線直徑分別為0.22mm、0.24mm、0.26mm、0.28 mm。MCAO模型手術操作參照改良Zea Longa法。根據各組大NMCAO模型成功率探索最適合模型栓塞效果的栓線直徑。
　　2.番茄紅素對腦缺血再灌注大鼠氧化應激及缺氧損傷的緩解作用
　　130-140 g SPF級雄性健康S

3、D大鼠64只，按體重隨機分為番茄紅素高劑量組(LPH)、番茄紅素低劑量組(LPL)、模型對照組(Model)各16只，假手術組(SHAM)10只和正常對照組(Nor)6只。LPH、LPL組大鼠每日分別以20、5 mg/kg.bw番茄紅素灌胃，Model組、SHAM組大鼠給予等量色拉油。灌胃15d后，Model組、LPL組和LPH組實施MCAO手術造模，缺血2h后進行再灌注；SHAM組施予假手術。術后禁食24h。分別于再灌注3h、24h后

4、對各組大鼠進行神經功能行為評分；再灌注24h后計算腦梗死體積，測定腦皮質組織超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase，SOD)、過氧化氫酶(Catalase，CAT)、丙二醛(Malondialdehyde，MDA)、活性氧(Reactive Oxygen Species，ROS)、一氧化氮(Nitricoxide，NO)、一氧化氮合成酶(Nitricoxide Synthase NOS)、誘導型一氧化氮合成酶(Indu

5、cibleNOS，iNOS)、乳酸(Lactic Acid，LD)及乳酸脫氫酶(LactateDehydrogenase，LDH)的含量或活性，以及血清尿酸(Uric Acid，UA)水平；并采用RT-PCR法檢測腦皮質及海馬組織中缺氧誘導因子-1α(Hypoxia-InducibleFactor-1α，HIF-1α)mRNA、B細胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphomaAeukemia-2，Bcl-2)mRNA的表達水平。

6、
　　結果：
　　1.MCAO模型成功大鼠出現明顯的Homer體征，其中B組(直徑0.24 mm)大廈模型成功率最高；D組(直徑0.28 mm)大鼠死亡率最高；A組(直徑0.22 mm)、及C組(直徑0.26 ram)大鼠因栓塞不完全和腦出血率較高，模型成功率均較低。
　　2.(1)LP對大鼠神經功能評分、腦梗死體積及腦指數的影響：LPH組、LPL組再灌注3h、24h神經評分及腦梗死體積均低于Model組(P<0.05

7、)，且LPH組腦梗死體積低于LPL組(P<0.05)；LPH、LPL及Model組腦指數均高于SHAM組及Nor組，LPH組腦指數較Model組降低，差異均有顯著性意義(P<0.05)。(2)LP對腦缺血再灌注24h后氧化應激的影響：LPH、LPL組大鼠缺血側腦皮質MDA、ROS及血清UA水平分別為(1.01±0.08 nmol/mgprot.114.23±8.91 Fluounit/gprot，154.56±15.39 umol/L)

8、，(1.09±0.05 nmol/mgprot，135.89±14.17 Fluo unit/gprot，164.42±14.76 umol/L)，與Model組相比均下降(P<0.05)；LPH、LPL組大鼠缺血側臍皮質CAT活性分別為(1.20±0.11 U/mgprot)，(1.08±0.15 U/mgprot)，LPH組SOD活性為(13.88±0.91 U/mgprot)，均高于Model組(P<0.05)。(3)LP對腦缺血

9、再灌注24h后繼發(fā)炎癥反應及缺氧損傷的影響：LPH、LPL組、Model組大鼠缺血側腦皮質NO含量和NOS、iNOS活性分別為(6.60±0.771amol/gprot，0.817±0.016 U/mg prot，0.502±0.022 U/mgprot)，(7.13±0.47μmol/gprot，0.875±0.095U/mgprot，0.523±0.039 U/mgprot)，(8.38±0.80μmol/gprot，1.030±0

10、.101 U/mgprot，0.612±0.030 U/mgprot)，與SHAM組和Nor組比較均升高(P<0.05)；而LP各組NO、LD含量及NOS、iNOS活性均較Model組降低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。(4)LP對腦缺血再灌注24h后大鼠缺血側腦組織HIF-1α mRNA、Bcl-2 mRNA表達水平的影響：HIF-1α mRNA：Model組大鼠腦皮質和海馬組織HIF-1αmRNA表達較SHAM、Nor組升高(P

11、<0.05)，而LPH組腦皮質及LPH、LPL組腦馬組織中HIF-1αmRNA的表達均高于Model組(P<0.05)；Bcl-2 mRNA：Model組大鼠腦皮質和海馬組織Bcl-2 mRNA的表達均較SHAM組降低(P<0.05)，而LPL組腦皮質及LPH、LPL組海馬組織Bcl-2 mRNA的表達較Model組均升高(P<0.05)。
　　結論：
　　1.260～280g體重的SD大鼠用直徑為0.24 mm的栓線進行M