膽囊收縮素、胰島素與胰高血糖素分泌細胞在小鼠胰腺發(fā)育過程中的形態(tài)學觀察.pdf

1、目的：觀察發(fā)育中昆明小鼠胰腺內(nèi)膽囊收縮素免疫反應(yīng)細胞(cholecystokinin immunoreactivecells，CCK-IR細胞)、胰島素免疫反應(yīng)細胞(insulin immunoreactive cells，Ins-IR細胞)和胰高血糖素免疫反應(yīng)細胞(glucagon immunoreactive cells，Glu-IR細胞)的發(fā)生、分布和形態(tài)特征；以及在胰腺內(nèi)膽囊收縮素與胰島素，胰島素與胰高血糖素是否有在同一細胞中共

2、存的現(xiàn)象。 方法： 應(yīng)用免疫組織化學SABC法觀察小鼠胚胎第11天到出生后第45天胰腺內(nèi)CCK-IR細胞、Ins-IR細胞和Glu-IR細胞的發(fā)生、分布及形態(tài)特征。并用免疫熒光雙標法觀察胰腺內(nèi)膽囊收縮素與胰島素、胰島素與胰高血糖素在同一細胞中是否有共存的現(xiàn)象。 結(jié)果： 免疫組織化學SABC法顯示，小鼠胚胎第11天，胰腺尚處于分化初期，在胰腺內(nèi)開始出現(xiàn)CCK-IR細胞、Ins-IR細胞和Glu-IR細胞。3

3、種細胞常成簇分布，淺染，細胞界限不清。至胚胎第15天后，3種細胞著色深淺不一，細胞界限逐漸可辨，在胰島內(nèi)呈散在分布。胚胎晚期至出生后，深染的Ins-IR細胞和Glu-IR細胞數(shù)量增多，Ins-IR細胞在胰島內(nèi)漸呈彌散狀分布，而Glu-IR細胞在胰島內(nèi)由散在分布逐漸移向周邊。出生后在胰島內(nèi)僅偶可見淺染的CCK-IR細胞。 胰腺外分泌部的導(dǎo)管和腺泡上皮細胞之間，胚胎期偶可見到上述3種細胞，但小鼠出生后僅可見到Ins-IR細胞和Glu

4、-IR細胞，而未見CCK-IR細胞。 免疫熒光法顯示，CCK-IR細胞的形態(tài)多樣，有些細胞可見伸出的細長突起。在胚胎期，CCK-IR細胞的熒光強弱不一，出生后，熒光逐漸減弱，但在出生后第45天，胰島的邊緣部仍可見到CCK-IR細胞。Ins-IR細胞和Glu-IR細胞的形態(tài)以橢圓形、圓形多見。胚胎第15天前，Ins-IR細胞和Glu-IR細胞的熒光較弱，其中，Glu-IR細胞的熒光強度比Ins-IR細胞強。胚胎晚期直至出生后第45

5、天，兩種細胞的熒光都逐漸增強。 免疫熒光雙標法觀察，自胚胎第14天至出生后第45天，小鼠胰腺內(nèi)始終可見CCK-Ins-IR細胞，其數(shù)量以胚胎晚期和生后第30天較多。自胚胎第11天至出生后第45天，小鼠胰腺內(nèi)可見Ins-Glu-IR細胞，其數(shù)量以胚胎第11天和生后第30天最多。生后在胰腺的外分泌部中也偶然可見Ins-Glu-IR細胞。 結(jié)論： 1．對于顯示發(fā)育中胰腺內(nèi)的CCK-IR細胞，免疫熒光法比普通免疫組織化學

6、技術(shù)更為敏感。 2．發(fā)育中小鼠胰腺內(nèi)CCK-IR細胞具有較典型的旁分泌細胞的形態(tài)特征；該細胞的分布時段提示，CCK-IR細胞可能以內(nèi)分泌、旁分泌等方式影響胰島內(nèi)分泌細胞及胰腺外分泌部的發(fā)生、發(fā)育，并參與調(diào)節(jié)小鼠生后胰腺的分泌活動。 3．免疫熒光雙標法可以較好地顯示兩種激素在同一細胞內(nèi)的共存現(xiàn)象，本實驗中所顯示的CCK-Ins-IR細胞、Ins-Glu-IR細胞可能是胰腺內(nèi)較幼稚的內(nèi)分泌細胞。 4．小鼠生后第30天