Vα24 NKT細胞的體外擴增和生物學功能研究.pdf

1、　　本研究擬建立體外誘導擴增Vα24NKT細胞的方法，探討特異抗原和細胞因子對擴增的影響；其次評價擴增的Vα24NKT細胞的特性以及細胞因子對其特性的影響；確定Vα24NKT細胞體外腫瘤殺傷活性以及對同種反應性T細胞免疫應答的抑制；初步論證Vα24NKT細胞在人-小鼠異種移植中的作用。　　本研究顯示α-GalCer能刺激成人外周血或臍帶血單個核細胞中的Vα24NKT細胞短期內大量擴增。外周血擴增效果優(yōu)于臍帶血。臍帶血CD34細胞能在不

2、含NKT細胞特異配體的細胞因子培養(yǎng)體系中誘導擴增Vα24NKT細胞，但效率相對較低。IL-2和IL-15是α-GalCer刺激擴增Vα24NKT細胞的基礎細胞因子。在α-GalCer存在時，IL-2和IL-15趨向于促進CD4-NKT細胞優(yōu)先擴增。在此基礎上，IL-12、IFN-γ促進CD4-NKT優(yōu)先擴增，IL-7則促進CD4+NKT細胞擴增。經α-Galcer擴增的Vα24NKT細胞能在有絲分裂原刺激下出現(xiàn)體外增殖反應；并能大量生成

3、IL-4和IFN-γ，以IFN-γ為主。IL-7主要通過作用于CD4+NKT細胞而促進IL-4的生成；IL-12和IFN-γ可能促使IFN-γ的生成。這種可能效應是通過無差異地作用于CD4+和CD4-細胞亞群來實現(xiàn)。Vα24NKT細胞能有效殺傷腫瘤細胞系HL-60、KGla和Raji，對NK細胞敏感細胞系K562無效；同時Vα24NKT細胞能有效抑制同種反應性T細胞免疫應答。在人-小鼠GVHD模型中，體外擴增的Vα24NKT細胞可能有助