甲霜靈對(duì)大豆疫霉野生菌株及突變菌株影響的組織細(xì)胞學(xué)研究.pdf

1、由大豆疫霉菌(Phytophthora soiae)引起的大豆疫病是大豆上危害嚴(yán)重的毀滅性病害之一。該病是我國(guó)A1類(lèi)進(jìn)境植物檢疫對(duì)象，也是內(nèi)檢對(duì)象。甲霜靈[N-(2,6-dimcthyl phenyl)-N-mcthoxyacetyl alanine]屬苯酰胺類(lèi)殺菌劑，是防治疫霉菌所致病害的特效藥。但由于甲霜靈屬特異性位點(diǎn)抑制劑，病菌容易對(duì)其產(chǎn)生抗性突變。本研究采用電鏡技術(shù)系統(tǒng)研究了大豆疫霉野生菌株和突變菌株的形態(tài)學(xué)及細(xì)胞學(xué)差異，甲霜靈

2、在活體外對(duì)野生菌株及突變菌株的形態(tài)結(jié)構(gòu)及細(xì)胞結(jié)構(gòu)的影響，并在此基礎(chǔ)上研究了甲霜靈種衣劑處理對(duì)大豆疫霉疫霉菌野生菌株和突變菌株侵染影響的組織病理學(xué)變化。本研究主要取得了以下成果： 1、野生菌株P(guān)s-411和突變菌株P(guān)s-411-M在菌絲形態(tài)和結(jié)構(gòu)上有明顯差異：Ps-411菌絲纖細(xì)、線(xiàn)狀，線(xiàn)條流暢，近直角分支，分支間距較長(zhǎng)，細(xì)胞內(nèi)含質(zhì)充盈，胞壁均勻；Ps-411-M生長(zhǎng)不規(guī)則，分支較密集，菌絲體較粗壯，少數(shù)菌絲頂端膨大、扭曲，菌絲細(xì)

3、胞內(nèi)液泡及線(xiàn)粒體數(shù)目明顯高于Ps-411。 2、不同濃度甲霜靈處理后可導(dǎo)致野生菌株和突變菌株發(fā)生一系列不同的變化。低濃度(1μg/mL)處理后，野生菌株在培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)即可受到抑制，菌絲呈現(xiàn)不規(guī)則的腫脹、過(guò)度分枝；菌絲細(xì)胞壁不規(guī)則加厚，菌絲細(xì)胞內(nèi)液泡增加，脂肪粒累積，細(xì)胞器排列紊亂，原生質(zhì)最終壞死。隨濃度的升高，野生菌株立即停止生長(zhǎng)，菌絲干癟壞死。而突變菌株只在高濃度(10μg/mL)甲霜靈處理后頂端菌絲出現(xiàn)少量較小的分枝，菌絲

4、細(xì)胞壁無(wú)增厚現(xiàn)象，但細(xì)胞內(nèi)脂肪粒大量積累，明顯高于敏感性菌株；突變菌株在高濃度甲霜靈壓力下仍繼續(xù)生長(zhǎng)。 3、大豆幼苗下胚軸試驗(yàn)表明：突變菌株P(guān)s-411-M和野生菌株P(guān)s-411在大豆幼苗下胚軸的侵染過(guò)程相似，都主要以侵染菌絲直接侵入表皮，表皮細(xì)胞間隙為主要侵入部位。胞間菌絲侵入皮層細(xì)胞并形成吸器。突變菌株P(guān)s-411-M致病力Ps-411-M要略弱于野生菌株P(guān)s-411。甲霜靈種衣劑處理后，Ps-411的生長(zhǎng)和擴(kuò)展受到抑制，病

5、狀表現(xiàn)為非親和反應(yīng)，而Ps-411-M則表現(xiàn)為較高的致病力，病狀表現(xiàn)為親和反應(yīng)。 4、甲霜靈種衣劑處理可引起野生菌株P(guān)s-411發(fā)生一系列細(xì)胞學(xué)變化。休止孢萌發(fā)畸形：芽管腫脹或極度延伸，不能形成附著孢。萌發(fā)相對(duì)滯后0.5h；入侵的菌絲僅在表皮和皮層間擴(kuò)展。菌絲細(xì)胞發(fā)生明顯的超微結(jié)構(gòu)變化：菌絲細(xì)胞有質(zhì)壁分離、原生質(zhì)壞死現(xiàn)象，液泡增大，寄主細(xì)胞壁加厚阻礙入侵栓的形成，類(lèi)吸器發(fā)育畸形；菌絲與寄主接觸部位出現(xiàn)大量的胞壁沉積物，有時(shí)寄主分