60例膽道惡性腫瘤患者診斷過(guò)程分析及其外周血清蛋白質(zhì)差異表達(dá)的初步研究.pdf

1、研究背景 膽管癌是一類(lèi)起病隱匿、預(yù)后較差的惡性腫瘤，黃疸+近端膽管擴(kuò)張+膽道占位性病變是本病的最常見(jiàn)診斷模式，黃疸的出現(xiàn)常預(yù)示病程已進(jìn)入晚期，多已失去手術(shù)機(jī)會(huì)，而目前尚缺乏敏感的放、化療手段1，能否早期診斷并行根治性切除成為影響本病預(yù)后的最主要因素。 腫瘤早期就可在蛋白質(zhì)水平出現(xiàn)細(xì)微但重要的改變2，致使血清等體液中可能含有大量未發(fā)現(xiàn)的可用作疾病標(biāo)志物的多肽3，血清樣品獲取相對(duì)方便，是人體內(nèi)部器官疾病最常用的檢驗(yàn)樣本，如果

2、從膽管癌患者外周血清中找到特異性表達(dá)的蛋白，對(duì)其進(jìn)行定性和功能分析，將會(huì)提高膽管癌的早期診斷率，使疾病的篩查和療效監(jiān)測(cè)更加便捷、準(zhǔn)確。目前臨床上常用的膽管癌診斷指標(biāo)，如CA19-9等，其特異性及臨床實(shí)際效果尚不能令人滿意。 差異蛋白質(zhì)組學(xué)研究著重于尋找和篩選任何有意義的兩個(gè)樣本之間的差異蛋白質(zhì)譜，揭示有機(jī)體生理和病理狀態(tài)的進(jìn)程與本質(zhì)、對(duì)外界環(huán)境刺激的反應(yīng)途徑、以及多種調(diào)控機(jī)制，同時(shí)獲得對(duì)某些關(guān)鍵蛋白的定性和功能分析。由于差異蛋白

3、質(zhì)組學(xué)研究并不要求捕獲“全部”蛋白，而重在找出有意義的差異蛋白，因而有一定的可實(shí)現(xiàn)性。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外學(xué)者將其應(yīng)用于腫瘤學(xué)的研究，其中重要的一項(xiàng)就是用其篩查腫瘤患者血漿/血清中特異性變化的蛋白質(zhì)，以找出應(yīng)用價(jià)值高的腫瘤標(biāo)記物。在膽道腫瘤方面尚未見(jiàn)到相關(guān)的研究報(bào)導(dǎo)。 研究目的及意義 1.回顧性分析60例膽道惡性腫瘤患者診斷過(guò)程，分析影響膽管癌早期診斷的各種因素，總結(jié)膽管癌診斷的基本步驟，提高早期診斷率，改善預(yù)后。 2

4、.對(duì)膽道惡性腫瘤患者和正常人(包括部分膽囊結(jié)石患者)外周血清蛋白質(zhì)表達(dá)進(jìn)行初步比較分析，找出表達(dá)有明顯差異的蛋白質(zhì)。 3.探索差異表達(dá)的蛋白質(zhì)作為有臨床診斷價(jià)值的新的膽管癌標(biāo)記物的可能性。 研究方法 1.回顧性分析2004年11月-2006年3月成功采集血清標(biāo)本的60例膽道惡性腫瘤患者首發(fā)癥狀、確診方式、確診過(guò)程、首發(fā)癥狀出現(xiàn)時(shí)間至手術(shù)時(shí)間，分析與診斷有關(guān)的各種因素，提出提高診斷率的可行方案。 2.用差異

5、蛋白質(zhì)組學(xué)的方法、SELDI蛋白質(zhì)芯片技術(shù)對(duì)60例膽道惡性腫瘤患者和60例正常人(包括部分膽囊結(jié)石患者)外周血清蛋白質(zhì)圖譜進(jìn)行檢測(cè)，PBSII-C型蛋白質(zhì)芯片閱讀機(jī)讀取數(shù)據(jù)，結(jié)果采用Ciphergen公司的BiomarkerWizard和BiomarkerPattern軟件分析，找出差異表達(dá)的蛋白質(zhì)。 研究結(jié)果： 1.黃疸+近端膽管擴(kuò)張+膽道占位性病變?nèi)允悄壳白畛Ｒ?jiàn)的膽管癌診斷方式，87％(52/60)的膽道腫瘤患者在出

6、現(xiàn)皮膚、鞏膜黃染后才首次進(jìn)行膽道腫瘤方面的檢查。 2.接診醫(yī)師的經(jīng)驗(yàn)與B超、CT等影像學(xué)檢查結(jié)合，在膽管癌診斷上起決定作用，CA19-9對(duì)無(wú)梗阻性黃疸及早期的膽管癌患者診斷精確性分別為53.8和54.5％。 3.膽管癌患者血清與正常人外周血清相比較，有10個(gè)蛋白表達(dá)有明顯差異，其中3個(gè)表達(dá)上調(diào)，7個(gè)表達(dá)下調(diào)，不同臨床分期患者之間外周血清蛋白質(zhì)表達(dá)也有差異。 結(jié)論： 1.膽管癌起病隱匿，早期診斷困難，目前臨

7、床確診主要依靠影像學(xué)檢查及接診醫(yī)師的經(jīng)驗(yàn)，腫瘤標(biāo)志物檢查對(duì)診斷僅起到輔助作用，缺乏對(duì)膽管癌靈敏性、特異性均高的標(biāo)志物。臨床上對(duì)于不明原因的右上腹疼痛、脹悶、惡心、皮膚瘙癢、小便深黃等癥狀的患者，應(yīng)考慮到膽道腫瘤的可能。 2.在膽道惡性腫瘤患者外周血清中存在多種與正常人表達(dá)明顯差異的蛋白質(zhì)，在不同臨床分期的膽道惡性腫瘤患者外周血清中也發(fā)現(xiàn)有表達(dá)明顯差異的蛋白質(zhì)。 3.比較蛋白質(zhì)組學(xué)研究在腫瘤標(biāo)記物篩選方面具有巨大的應(yīng)用前景