蛋白質(zhì)組學(xué)對(duì)不同透析膜吸附血清蛋白的分析.pdf_第1頁
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:
  血液透析是尿毒癥患者的主要治療方式之一,透析膜是決定透析效果最重要的因素,對(duì)透析膜表面吸附的蛋白的研究,以便于理解透析膜表面發(fā)生的生化反應(yīng),并且為透析膜的改良提供基礎(chǔ)。
  方法:
  選我院連續(xù)兩次透析分別應(yīng)用金寶低通Polyflux14L(PAES/PVP/PA)透析器及費(fèi)森尤斯低通Fx8(PS/PVP)透析器患者2名作為材料差異組;連續(xù)兩次透析分別應(yīng)用金寶高通Polyflux140H透析器及金寶低通P

2、olyflux14L透析器患者2名作為通量差異組。用離子液體(C12Im-Cl,氯化-1-十二烷基-3-甲基咪唑)處理入選患者使用的透析器(N=8),以洗脫透析膜上吸附的蛋白,蛋白酶解并化學(xué)標(biāo)記后混合;取患者透析前、后血液,分離血清標(biāo)本并酶解血清蛋白,化學(xué)標(biāo)記后混合。應(yīng)用LC-MS/MS的方法對(duì)血清蛋白及透析膜洗脫蛋白進(jìn)行分離和鑒定,對(duì)蛋白質(zhì)的分子量(MW)、等電點(diǎn)(pI)等分子信息和蛋白質(zhì)功能進(jìn)行對(duì)比或分析。
  結(jié)果:

3、  1.不同透析膜對(duì)蛋白的吸附規(guī)律不同,在吸附蛋白量方面,材料差異組:與PAES/PVP/PA合成膜相比,PS/PVP合成膜上有45種表達(dá)量升高,253種降低;通量差異組:與高通量透析膜相比,低通量透析膜上有284種表達(dá)量升高,174種表達(dá)量降低。在吸附蛋白的pI及MW分布方面,PAES/PVP/PA與 PS/PVP合成膜在吸附蛋白的pI及MW無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05);高通量透析膜對(duì)MW<40kDa,pI>7.5的蛋白吸附比例高(p

4、I:46% vs.29%,?2=11.293,P=0.001,MW:71% vs.57%,?2=8.133,P=0.004),低通量透析膜對(duì)MW40kDa~100kDa,pI5.5~7.5的蛋白吸附比例高(pI:41%vs.30%,?2=4.906,P=0.027,MW:33%vs.22%,?2=5.978,P=0.014)。
  2.透析膜表面差異蛋白不同。材料差異組,甘露糖結(jié)合凝集素絲氨酸蛋白酶1,半乳糖凝集素1,特異性表達(dá)于

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