水紅花子中黃酮的分離分析及抗氧化性研究.pdf

1、本文研究了中藥水紅花子中黃酮類化合物的提取、純化與測定方法，同時(shí)對水紅花子中黃酮粗提物及花旗松素清除1，1-二苯基苦基苯肼(1，1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl radical，簡稱DPPH)的能力進(jìn)行了初步探討。 (1)總黃酮的提取。以總黃酮的得率為檢測指標(biāo)，分別采用了超聲提取法和微波提取法進(jìn)行提取。通過單因素實(shí)驗(yàn)以及正交實(shí)驗(yàn)，確定了兩種提取方法的最佳提取工藝，微波提取法效果較好，總黃酮得率達(dá)3.41％。

2、 (2)總黃酮的純化。比較了五種大孔樹脂的吸附、解吸性能，選擇S-8型大孔樹脂純化水紅花子總黃酮，采用濃度為1.50mg/mL水紅花子提取液以1BV/h流速上柱，60％乙醇1BV/h流速進(jìn)行洗脫，所得總黃酮粗品純度達(dá)83.26％。 (3)花旗松素的分離。采用鉛鹽沉淀、硅膠柱層析和制備型反相高效液相色譜三種方法對水紅花子中花旗松素進(jìn)行分離純化。確定了最佳分離條件，其中制備型反相高效液相色譜法效果較好，產(chǎn)品純度可達(dá)96.26

3、％。 (4)總黃酮和花旗松素的測定?？傸S酮的測定，利用分光光度法，以蘆丁為對照品，得蘆丁濃度C(μg/mL)與吸光度A的回歸方程：A=3.81×10-4+6.66×C(r=0.99935)，蘆丁濃度在8～64μg/mL的范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，加標(biāo)回收率97.5％～103.3％；花旗松素的測定，采用高效液相色譜法，色譜條件為：Lichrospher C18柱(150mm×4.6mm；5μm)，流動(dòng)相為甲醇-0.3％的乙酸水溶液(35

4、:65，v/v)等度洗脫，檢測波長290nm，流速0.8mL/min，柱溫25℃，得花旗松素濃度C與峰面積Y的回歸方程：Y=1.54×103+1.40×104×C(r=0.99995)，線性范圍25～150μg/mL。 (5)總黃酮提取物和花旗松素抗氧化性實(shí)驗(yàn)。采用不同溶劑提取的黃酮粗提物均具有一定程度清除DPPH自由基的能力，但清除能力差異較大，其強(qiáng)弱順序?yàn)榧状?乙醇>水>乙酸乙酯>氯仿；花旗松素清除DDH自由基的能力略高于蘆