黃芪制劑對Hela細胞生長增殖及其相關調(diào)控分子表達影響的實驗研究.pdf

1、目的：惡性腫瘤目前已成為危害人類生命健康最重要的疾病之一，每年約100萬人因患癌癥而死亡，對其發(fā)病機理及治療的研究已取得一定的成績，綜合治療原則已越來越受關注，尤其是我國傳統(tǒng)中藥制劑用于治療和輔助治療腫瘤的研究已成為新熱點。以往的研究多是針對中藥抑制腫瘤生長方面，而對某些中藥促進腫瘤細胞生長增殖作用的研究報道較少。我們在預實驗中發(fā)現(xiàn)，已作為益氣類傳統(tǒng)中藥應用于臨床，以及作為扶正祛邪類抗瘤中藥制劑應用于輔助治療腫瘤的黃芪制劑（AMB）可促

2、進宮頸癌細胞生長增殖，提示黃芪及其提取物作為傳統(tǒng)中藥，能否應用于宮頸癌患者及具此類腫瘤誘發(fā)體質(zhì)人群的其他疾病的治療尚存在爭議。本課題旨在通過實驗探討AMB對宮頸癌Hela細胞生長增殖及其相關調(diào)控分子表達的影響，為指導臨床合理選用及慎用此種抗瘤中藥制劑奠定實驗基礎和提供理論依據(jù)。
　　 方法：確定最適宜的腫瘤細胞接種濃度及培養(yǎng)時間后，選用不同濃度的AMB作用于Hela細胞，以不經(jīng)AMB作用的相應同步培養(yǎng)的Hela細胞作對照。MTT

3、法測定AMB作用后對Hela細胞生長增殖變化的A492值。采用流式細胞計數(shù)法檢測細胞周期及增殖凋亡狀況，并計算出凋亡指數(shù)（AI）和增殖指數(shù)（PI）。培養(yǎng)細胞以HE染色進行常規(guī)病理觀察；采用免疫細胞化學法測定Hela細胞中 PCNA、Bax、Bcl-2等增殖凋亡相關分子表達的變化，分別以矩形走行計數(shù)200個細胞，計算表達陽性細胞百分率表示陽性表達范圍；并以圖像分析系統(tǒng)所示陽性酶點（PED）表示陽性染色范圍大小，以灰度值（GS）表示陽性染色

4、強度（取值范圍為0～255，其數(shù)值越大表示陽性染色越弱，數(shù)值越小表示陽性染色越強）。
　　 結(jié)論：
　　 1.AMB在一定濃度范圍內(nèi)可抑制Hela細胞的凋亡，促進其生長增殖。
　　 2 AMB在一定濃度范圍內(nèi)可使Hela細胞出現(xiàn)S期阻滯，以促進細胞生長增殖。
　　 3.AMB在一定濃度范圍內(nèi)可使Hela細胞中Bcl-2、PCNA表達增強，Bax表達降低。
　　 4.AMB在臨床抗腫瘤及其他疾病治療