下咽癌瘤內(nèi)淋巴管生成及頸淋巴轉(zhuǎn)移關(guān)系的研究.pdf

1、研究背景：
　　 下咽癌發(fā)生部位隱蔽不易早期發(fā)現(xiàn)，且生物學(xué)特征惡劣易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。轉(zhuǎn)移是影響患者預(yù)后的重要因素。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，下咽癌5年生存率為28.6％-59.1％，其中出現(xiàn)頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者較無轉(zhuǎn)移者5年生存率下降約50％。長(zhǎng)期以來，大量的研究集中在腫瘤的血管生成及血行轉(zhuǎn)移，一些抗腫瘤血管生成的藥也己進(jìn)入臨床。由于缺乏特異的淋巴管內(nèi)皮標(biāo)志物，對(duì)淋巴管的生成及轉(zhuǎn)移機(jī)制的研究進(jìn)展緩慢，對(duì)腫瘤組織內(nèi)是否存在新生淋巴管，腫瘤淋巴轉(zhuǎn)移的途

2、徑等問題仍有爭(zhēng)論。近年來研究發(fā)現(xiàn)多種淋巴管內(nèi)皮標(biāo)志物，如血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C、D(VEGF-C/D)及其受體VEGFR-3，和淋巴管內(nèi)皮特異性標(biāo)志物，如同源異型盒轉(zhuǎn)錄因子Prox-1、透明質(zhì)酸受體LYVE-1、腎小球足突膜蛋白podoplanin和D2-40。不同于VEGFR-3同時(shí)表達(dá)于淋巴管內(nèi)皮和某些腫瘤的微血管內(nèi)皮、腫瘤細(xì)胞，D2-40只在淋巴管內(nèi)皮表達(dá)，在血管內(nèi)皮不表達(dá)。國外學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)D2-40是一種高選擇性與podopla

3、nin結(jié)合的抗體，和其它淋巴管內(nèi)皮標(biāo)志物如：LYVE-1、podoplanin和Prox-1相比，D2-40有更高的特異性。因此，D2-40可常規(guī)用于觀察淋巴管形態(tài)、分布，便于研究淋巴管生成、淋巴管轉(zhuǎn)移。已有研究表明堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子b-FGF、VEGF-C、VEGF-D、COX-2參與腫瘤淋巴管生成，并在腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用。抗腫瘤淋巴管生成有望成為抗腫瘤治療的新方式。
　　 目的：
　　 觀察D2-40標(biāo)

4、記的淋巴管的形態(tài)，分別比較下咽癌患者腫瘤組織中和癌旁正常黏膜中b-FGF、D2-40的表達(dá)情況，檢測(cè)淋巴管密度(LVD)，并與淋巴轉(zhuǎn)移情況進(jìn)行分析，探討D2-40的臨床病理意義，下咽癌可能的淋巴轉(zhuǎn)移途徑，分析探討下咽癌淋巴管生成機(jī)制，為下咽癌治療和判斷預(yù)后提供理論依據(jù)。
　　 方法：
　　 材料取自2007年10月～2009年9月間山東大學(xué)齊魯醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科行手術(shù)切除的下咽癌47例及癌旁正常下咽黏膜組織。應(yīng)用免疫組

5、織化學(xué)方法分別檢測(cè)這47例患者瘤內(nèi)和癌旁正常黏膜組織b-FGF、D2-40的表達(dá)，觀察瘤內(nèi)和癌旁正常黏膜組織中淋巴管形態(tài)有無差別，同時(shí)采用Greespan半定量法對(duì)細(xì)胞染色強(qiáng)度及陽性細(xì)胞百分率進(jìn)行評(píng)分，Weidner法對(duì)淋巴管進(jìn)行計(jì)數(shù)，并與臨床病理參數(shù)進(jìn)行分析。應(yīng)用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，對(duì)結(jié)果用t檢驗(yàn)、秩和檢驗(yàn)、X2檢驗(yàn)或Fisher確切概率法進(jìn)行分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn)取0.05。
　　 結(jié)果：
　　 1．b-FGF在下咽

6、癌瘤內(nèi)陽性表達(dá)率為82.98％，在正常組織中的陽性表達(dá)率為8.51％，兩者差異顯著(P=0.000)。b-FGF在不同年齡、性別、T分期、高-中分化和低分化間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者b-FGF陽性表達(dá)率高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(P＜0.05)。
　　 2．下咽癌腫瘤組織中可觀察到新生淋巴管：淋巴管形態(tài)幼稚，并且部分管腔內(nèi)可見腫瘤細(xì)胞。而在正常組織中淋巴管多呈擴(kuò)張狀。
　　 3．下咽癌瘤內(nèi)LVD值高于癌旁

7、正常粘膜組織LVD值，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。腫瘤淋巴管密度和患者的年齡、性別、腫瘤的T分期和分化程度差別均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，而與N分期之間差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 4.下咽癌組織中b-FGF陽性表達(dá)的LVD值高于b-FGF陰性表達(dá)的LVD值，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 本研究發(fā)現(xiàn)，在下咽癌腫瘤組織內(nèi)與癌旁正常黏膜組織中D2-40標(biāo)記的淋巴管形態(tài)不

8、同，屬于未發(fā)育成熟的淋巴管，這與國外學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)的新生淋巴管形態(tài)一致，證明其為新生淋巴管。腫瘤內(nèi)高表達(dá)的淋巴管密度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)(P＜0.05)提示新生淋巴管是有功能的，瘤內(nèi)淋巴管生成增多腫瘤轉(zhuǎn)移亦增加，即腫瘤可能是通過這些淋巴管轉(zhuǎn)移到淋巴結(jié)。b-FGF陽性表達(dá)和陰性表達(dá)在瘤內(nèi)和正常組織間、淋巴管密度間存在差異，提示高表達(dá)b-FGF會(huì)誘導(dǎo)腫瘤內(nèi)淋巴管生成。因此，我們認(rèn)為下咽癌內(nèi)存在新生淋巴管，b-FGF可促進(jìn)其生成，從而促進(jìn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移