SIX1蛋白在胃腺癌預(yù)后評(píng)估中的標(biāo)志物作用研究.pdf

1、研究背景：SIX1蛋白屬于同源盒轉(zhuǎn)錄因子SIX家族成員。SIX1蛋白在多種早期胚胎組織中表達(dá)，在成熟組織中無(wú)表達(dá)，但在乳腺癌、卵巢癌、宮頸癌及肝癌等癌組織中過(guò)表達(dá)，并與癌的惡性進(jìn)展及不良預(yù)后有關(guān)，然而SIX1蛋白在胃腺癌中的作用仍不明確。
　　目的：研究SIX1蛋白在胃癌細(xì)胞中的定位表達(dá)情況，并分析其過(guò)表達(dá)與胃腺癌臨床病理學(xué)特征及預(yù)后評(píng)估之間的關(guān)系。
　　材料與方法：應(yīng)用細(xì)胞免疫熒光和SIX1 siRNA轉(zhuǎn)染技術(shù)檢測(cè)并驗(yàn)證S

2、IX1蛋白在胃癌細(xì)胞系MKN-1中的表達(dá)定位。同時(shí)，應(yīng)用實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)(qRT-PCR)檢測(cè)12對(duì)新鮮胃癌組織及其癌旁正常胃粘膜組織中SIX1 mRNA的表達(dá)水平；應(yīng)用免疫組化法檢測(cè)163例胃癌組織，35例胃粘膜上皮非典型增生組織和26例癌旁正常胃粘膜組織中SIX1蛋白的表達(dá)，并結(jié)合臨床資料對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析及總生存期分析。
　　結(jié)果：細(xì)胞免疫熒光染色和轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)顯示，在MKN-1胃癌細(xì)胞中，SIX1蛋白主要定位于胞漿，少

3、量定位于胞核，與免疫組化中細(xì)胞染色結(jié)果一致。免疫組化結(jié)果表明163例胃癌組織中SIX1蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率為80.4％（131/163），明顯高于非典型增生（45.7%,16/35）或正常胃粘膜組織（26.9%,7/26）（P<0.01）；qRT-PCR數(shù)據(jù)亦證實(shí)SIX1 mRNA表達(dá)水平在胃癌組織中明顯增高。同樣，胃癌組織中的SIX1蛋白強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)率（63.2%,103/163）與非典型胃癌組織（20.0%,7/35）（P<0.01）及正

4、常胃粘膜組織（11.5%，3/26）（P<0.01）相比明顯增高。在163例胃癌組織中，SIX1強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)率與腫瘤大小、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和漿膜侵襲浸潤(rùn)明顯相關(guān)（P<0.01，P<0.05），然而與性別、年齡、Lauren分型及組織分型無(wú)關(guān)。腫瘤血管與淋巴管中SIX1蛋白明顯呈陽(yáng)性表達(dá)。生存期分析結(jié)果顯示SIX1蛋白高表達(dá)組的胃癌患者總生存率及無(wú)病生存率明顯低于SIX1蛋白低表達(dá)的患者（P<0.001）。另外，多變量分析結(jié)果顯示SIX