人肝癌血管內(nèi)皮細胞表型和功能特性的研究.pdf

1、人肝癌血管內(nèi)皮細胞表型和功能特性的研究腫瘤的生長和轉移是血管生成依賴的,抑制腫瘤的血管生成可以抑制腫瘤的生長和腫瘤的轉移.新近的研究資料表明:腫瘤血管內(nèi)皮細胞是特殊分化的,它們在基因、形態(tài)、表型、和功能特性上與正常血管內(nèi)皮細胞相比都有明顯差異.因此,研究腫瘤血管內(nèi)皮細胞的表型和功能特性對于研究腫瘤血管生成的機制、尋找和發(fā)現(xiàn)抗腫瘤血管生成治療的目標因子都具有重要價值.1目的:通過對人肝癌組織分離培養(yǎng)的血管內(nèi)皮細胞與人正常肝竇內(nèi)皮細胞的比較

2、研究,分析人肝癌血管內(nèi)皮細胞在形態(tài)、表型和功能上的特性.2方法:從人肝癌組織分離、純化和培養(yǎng)血管內(nèi)皮細胞并進行鑒定;掃描電子顯微鏡(SEM)和透射電子顯微鏡(TEM)檢查細胞表面的窗孔結構;流式細胞儀(FACS)分析細胞表型;四唑鹽比色法(MTT)、酶聯(lián)免疫分析(ELISA)和酶譜法(zymography)比較肝癌內(nèi)皮細胞與人肝竇內(nèi)皮細胞在細胞增殖、過氧化氫(H<,2>O<,2>)誘導的細胞毒、基質金屬蛋白酶釋放和凝血、纖溶活性上的差別

3、.3結果:分離、純化的人肝癌血管內(nèi)皮細胞表達內(nèi)皮細胞典型的標志分子vWF、CD31,并攝取乙酰化低密度脂蛋白;掃描電鏡證實細胞表面存在大量窗孔;流式細胞儀分析發(fā)現(xiàn),與人肝竇內(nèi)皮細胞相比,肝癌血管內(nèi)皮細胞表達高水平的TNF Ⅱ型受體(TNFR p75)和低水平的TNF Ⅰ型受體(TNFR p55),細胞表面的各種粘附分子表達降低并特異性表達新生血管標志αvβ3;功能學研究發(fā)現(xiàn):肝癌內(nèi)皮細胞表現(xiàn)高增殖率、對H<,2>O<,2>抵抗力強、釋放