水稻細菌性谷枯病菌的分子檢測及細菌性褐條病病原鑒定研究.pdf

1、水稻細菌性谷枯病菌Burkholderia glumae不但引起谷?？荻乙惨鹧砻绺癄€，已對發(fā)生國家的水稻生產構成嚴重威脅。鑒于其檢疫重要性，2007年被列為我國進境檢疫性有害生物，然而，國內尚未建立該菌的檢測方法．本研究采用實時熒光PCR(Real-time fluorescence PCR)和經典PCR技術進行水稻細菌性谷枯病菌檢測，擬建立準確、快速、靈敏的方法，以有效控制該病在我國的擴散和蔓延．研究結果表明，供試所有谷枯病菌都能

2、產生139bp左右的特異性片段，非谷枯菌株均無特異性片段產生．兩種檢測方法的靈敏度比較發(fā)現，常規(guī)PCR技術能檢測到104CFU/ml左右的菌懸液，實時熒光PCR技術能檢測到102CFU/ml左右的茵懸液，實時熒光PCR比常規(guī)PCR靈敏度提高100倍。將模擬帶菌種子與滅菌種子按1：100混合，可以檢測到該菌的存在。 水稻細菌性褐條病可由Acidovorax avenae subspecies avenae和Pseudomonas

3、syringae pv.panici兩種完全不同的病原引起，主要造成秧苗腐爛，是水稻苗期的主要病害之一。為明確從褐條病稻苗上分離出來的細菌屬于哪一種病原，以便開展有效的病害治理。分離獲得6株褐條病致病細菌，其中4株經主要細菌學特性、菌落形態(tài)、致病性、Biolog、脂肪酸分析(FAME)、電鏡觀察、Nested-PCR鑒定及與3株水稻細菌性褐條病標準菌株及2株西瓜果斑病標準菌株的比較，證實了該病是由單極鞭革蘭氏陰性細菌Acidovorax