抗水稻細(xì)菌性條斑病芽孢桿菌菌株的選育研究.pdf

1、解淀粉芽孢桿菌物種豐富，廣泛分布在土壤和植物表面。近年來隨著解淀粉芽孢桿菌具有抑制多種植物病原菌能力的發(fā)現(xiàn)，使其成為了具有生物農(nóng)藥發(fā)展?jié)摿Φ奈⑸铩?br>　　從湖南、廣西等地水稻田采取土壤樣品，經(jīng)分離、純化得到9763株芽孢桿菌，采用牛津杯法測定分離菌株對水稻細(xì)菌性條斑病菌的拮抗能力，篩選得到具有拮抗能力的芽孢桿菌310株，經(jīng)過多次重復(fù)篩選，最終得到拮抗能力強(qiáng)且穩(wěn)定的菌株JF48，其對水稻細(xì)菌性條斑病的抑菌圈直徑達(dá)37±3mm。通過對

2、該菌株的形態(tài)、生理生化以及16S rDNA序列進(jìn)行分析，鑒定該菌株為解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)。
　　通過搖瓶培養(yǎng)試驗，研究了不同碳源、氮源、無機(jī)鹽種類、搖瓶裝液量、轉(zhuǎn)速、起始pH、發(fā)酵培養(yǎng)溫度、接種量對解淀粉芽胞桿菌JF48菌株芽孢產(chǎn)量及芽孢轉(zhuǎn)化率的影響。然后通過Plackett-Burman試驗從單因素試驗得到的最佳因素中篩選出三個顯著影響因子，分別為玉米粉、豆粕粉、發(fā)酵培養(yǎng)溫度。最

3、后，經(jīng)響應(yīng)面法優(yōu)化后的最佳發(fā)酵培養(yǎng)條件為:玉米粉14.69 g/L、豆粕粉9.54 g/L、CaCl22 g/L、NaCl5g/L、MgSO41g/L、裝液量50 mL/250 mL、轉(zhuǎn)速為200rpm、初始pH7.5、溫度38℃、接種量1％。在此發(fā)酵培養(yǎng)條件下，芽孢產(chǎn)量達(dá)到3.6×109cfu/mL，與優(yōu)化前相比提高了105倍。
　　通過單因素試驗，確定解淀粉芽孢桿菌JF48菌株可濕性粉劑的最佳配方如下:載體硅藻土10％、助劑聚