去乙?；窼IRT1調(diào)控卵丘顆粒細(xì)胞凋亡對(duì)單精子卵胞漿內(nèi)顯微注射助孕的影響.pdf

1、目的：本研究擬對(duì)去乙酰化酶SIRT1調(diào)控人卵丘顆粒細(xì)胞凋亡對(duì)單精子卵胞漿內(nèi)顯微注射的影響進(jìn)行研究，并探討SIRT1、FOXO3a通路調(diào)控顆粒細(xì)胞凋亡的機(jī)制。
　　方法：采用免疫細(xì)胞化學(xué)染色、Western-blot法檢測(cè)人卵丘顆粒細(xì)胞 SIRT1和FOXO3a蛋白的表達(dá)；采用Real-time PCR技術(shù)檢測(cè)SIRT1和FOXO3a mRNA的表達(dá)；采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)凋亡蛋白Caspase-3的活化情況，分析顆粒細(xì)胞凋亡率；采用化

2、學(xué)發(fā)光法檢測(cè)卵泡液各項(xiàng)生化免疫指標(biāo)。
　　結(jié)果：⑴人卵丘顆粒細(xì)胞SIRT1蛋白表達(dá)與顆粒細(xì)胞凋亡顯著相關(guān)（P＜0.05）。⑵隨著顆粒細(xì)胞SIRT1表達(dá)增高，顆粒細(xì)胞凋亡率隨之升高，穿卵泡數(shù)、獲卵數(shù)、ICSI卵子數(shù)、受精數(shù)、卵裂數(shù)、優(yōu)質(zhì)胚胎數(shù)、囊胚形成數(shù)、囊胚冷凍數(shù)則隨之下降（P＜0.01）。⑶人卵丘顆粒細(xì)胞 SIRT1基因和蛋白的表達(dá)與 FOXO3a表達(dá)顯著相關(guān)（P＜0.01）。4、卵泡液雌激素E2水平與顆粒細(xì)胞SIRT1表達(dá)顯著