體外成熟期間葡萄糖代謝對小鼠卵母細(xì)胞胞質(zhì)成熟影響.pdf

1、我們知道，卵母細(xì)胞的成熟包括兩個過程，即核成熟和胞質(zhì)成熟。核成熟是指第一次減數(shù)分裂的恢復(fù)，并最終排出第一極體;胞質(zhì)成熟是指著床前胚胎發(fā)育能力獲得的過程。卵母細(xì)胞發(fā)育能力是反應(yīng)胞質(zhì)成熟的最直接指標(biāo)。葡萄糖在卵丘-卵母細(xì)胞復(fù)合體中有以下四種代謝途徑:戊糖磷酸途徑，糖酵解途徑，多元醇途徑和己糖胺生物合成途徑，尤其以糖酵解和戊糖磷酸途徑更加重要。目前之所以還沒有人通過直接添加抑制劑來說明葡萄糖代謝與發(fā)育能力的關(guān)系，是因為添加葡萄糖代謝抑制劑后阻

2、斷了卵母細(xì)胞的核成熟，沒有足夠多的核成熟卵母細(xì)胞進(jìn)行隨后的發(fā)育實驗。我們建立一種新的小鼠卵母細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)，加入葡萄糖代謝抑制劑后仍能獲得足夠多的核成熟卵母細(xì)胞，對其孤雌激活并檢測發(fā)育能力，從而闡明體外成熟期間葡萄糖代謝對小鼠卵母細(xì)胞胞質(zhì)成熟的影響。結(jié)果如下:
　　1)COCs在單獨添加5.6mM葡萄糖的培養(yǎng)液中培養(yǎng)15h，卵母細(xì)胞的成熟率達(dá)到100％;添加0.56mM葡萄糖時，成熟率顯著降至81.3％;不添加葡萄糖時，成熟率只有1

3、6.8％。
　　2)COCs在單獨添加1.5mM乳酸鈉培養(yǎng)液中培養(yǎng)15h，卵母細(xì)胞的成熟率為93.3％，添加0.5mM乳酸鈉時，成熟率顯著降至78.0％;0.25mM乳酸鈉時，成熟率顯著降至41.9％;不添加乳酸鈉時，成熟率只有17.7％。
　　3)COCs在單獨添加5.6mM葡萄糖培養(yǎng)液中培養(yǎng)后，卵母細(xì)胞經(jīng)Srcl2激活后的囊胚發(fā)育率顯著高于單獨添加1.5mM乳酸鈉或0.5mM乳酸鈉時的水平，而與5.6mM葡萄糖聯(lián)合0.5

4、mM乳酸鈉相比沒有顯著差異。
　　4)COCs在單獨添加2mM丙酮酸鈉培養(yǎng)基中培養(yǎng)后，卵母細(xì)胞的成熟率和經(jīng)Srcl2激活后的各項發(fā)育指標(biāo)均能達(dá)到5.6mM葡萄糖的水平。
　　5)COCs在添加5.6mM葡萄糖和0.5mM乳酸鈉以及1.5μM Iodoacetate培養(yǎng)液中培養(yǎng)后，與不添加相比Iodoacetate，成熟率、激活率和4-細(xì)胞率沒有顯著差異，而桑椹胚率和囊胚率顯著降低，其中囊胚率從33.2％降低到20.0％。

5、r>　　6)COCs在添加5.6mM葡萄糖和0.5mM乳酸鈉以及150μM DHEA培養(yǎng)液中培養(yǎng)后，與不添加DHEA相比，成熟率、激活率和4-細(xì)胞率沒有顯著差異，而桑椹胚率和囊胚率顯著降低，其中囊胚率從29.4％降低到11.6％。
　　7)COCs在添加2mM丙酮酸鈉、0.025μM魚藤酮培養(yǎng)液培養(yǎng)后，與不添加魚藤酮相比，卵母細(xì)胞的成熟率、激活率、4-細(xì)胞率沒有受到顯著影響，而桑椹胚率和囊胚率都顯著降低。
　　綜上所述，體外