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文檔簡介
1、慶大霉素(gentamicin,GM)是一組結構相近的氨基糖苷類多組分抗生素,以C族復合物為主,對多種革蘭氏陰性菌和陽性菌有較強的抗菌作用。起主要作用的C族復合物中C1組份毒副作用小,不易耐藥,但療效不如C2和C1a。而C2和Cla雖療效高但毒性大且易耐藥。目前主要通過發(fā)酵菌種及工藝的調節(jié)對GM組分進行控制。近年來發(fā)現(xiàn)GMC1a組分可作為合成抗菌藥物依替米星的前體藥物,應用空間較大,而現(xiàn)有工藝落后,因此需要由GM復合物中分離出GMC1a
2、組分。 慶大霉素組分檢測方法研究:在確定薄層色譜進行分離的基礎上,分別比較了碘蒸汽顯色法和熒光顯色法,并對兩種不同體系的影響因素(如活化時間、活化溫度、展開劑配比等)進行考察,發(fā)現(xiàn)熒光法可以分離出更多的小組分,因此更適合于定性檢測。定量檢測的研究分別采用了白度法和比色法。白度法雖然測定結果誤差較大,但是從另一個角度提供了解決此類問題的辦法。在將薄層色譜碘蒸汽顯色法與比色法相結合后,確立了快速準確測定慶大霉素組分的方法,得到GM標
3、準曲線,回歸方程為Y=0.00892X—0.02393,r=0.9986,線性范圍為2~100mg/ml,其三組分誤差分別為0.19%、0.27%和3.70%。檢測結果與藥典法測定的標準含量基本吻合,準確度高,并確定此方法為后續(xù)實驗的檢測方法。最后用此方法對慶大霉素樣品進行了測定,確定其組分Cla、C2、C1含量分別為32.9%、39.4%和27.7%。 慶大霉素離子交換性能研究:靜態(tài)法研究了慶大霉素及其組分的吸附動力學曲線,樹
4、脂對慶大霉素的吸附在160min左右達到平衡,交換容量可達8mmol/g。對慶大霉素C1a、C2、C1組分的交換容量分別為2.55、3.15、2.31mmol/g。慶大霉素的吸附動力學曲線表明,三組分的吸附基本上按濃度比例同步增長。溫度對慶大霉素吸附的影響并不顯著可以忽略。pH8時慶大霉素及其各組分的離子交換均達到最大值。當pH=9~10的范圍內,慶大霉素C1a組分與其他兩組分的吸附能力有明顯差別,利用此差別進行解吸實驗。確立了1.5M
5、和2.0M兩個梯度作為慶大霉素的梯度洗脫濃度。 樹脂合成條件對慶大霉素組分分離的影響:分別對樹脂的物理結構、單體配比、交聯(lián)度、水解條件進行了單因素極端情況考察,確定孔對慶大霉素的離子交換作用影響不大,可忽略。存在最適交聯(lián)度,存在最適MMA量。水解條件中對考察指標的影響大小為:水解時間>NaOH濃度>水解溫度。通過單因素實驗確定多因素正交實驗的因素及水平,分別以全交換容量,對慶大霉素的相對交換容量,最后一次解吸液中GM的含量以及C
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