卒中后抑郁大鼠模型海馬ARNT2、NPAS4表達(dá)調(diào)控及與認(rèn)知功能損傷關(guān)系研究.pdf

1、背景
　　 腦卒中后抑郁(post-stroke depression，PSD)是腦卒中發(fā)生后所表現(xiàn)出來的一種心境障礙，常伴有認(rèn)知功能的損傷。其抑郁情緒和認(rèn)知障礙相互作用，極大影響神經(jīng)功能的康復(fù)和患者的生存質(zhì)量。芳烴受體核轉(zhuǎn)位蛋白2(aryl hydrocarbon receptornuclear translocator2，ARNT2)和神經(jīng)元PAS結(jié)構(gòu)域蛋白4(neuronal PAS domainprotein4，NPAS

2、4)均為海馬基因調(diào)控中的轉(zhuǎn)錄因子，其表達(dá)變化可能通過調(diào)控腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(Brain-derived neurotrophic factor，BDNF)的功能對(duì)PSD的情緒改變和認(rèn)知功能產(chǎn)生影響。
　　 目的
　　 1明確ARNT2、NPAS4在PSD大鼠模型海馬中的表達(dá)，了解PSD大鼠模型海馬ARNT2-NPAS4調(diào)控BDNF表達(dá)模式。
　　 2了解ARNT2、NPAS4表達(dá)變化與認(rèn)知功能損傷之間是否存在聯(lián)系

3、，探討ARNT2、NPAS4表達(dá)調(diào)控參與PSD認(rèn)知功能損傷過程的可能機(jī)制。
　　 方法
　　 1通過大腦中動(dòng)脈阻塞(middle cerebral artery occlusion，MCAO)法制備局灶性腦缺血大鼠模型，在此基礎(chǔ)上綜合孤養(yǎng)、慢性不可預(yù)見性溫和刺激(chronicunpredictable mild stress，CUMS)復(fù)合制備PSD大鼠模型。
　　 2采用Longa法評(píng)定局灶性腦缺血大鼠的神經(jīng)

4、功能缺損程度；測(cè)量體重觀察大鼠體重變化；采用蔗糖水消耗實(shí)驗(yàn)測(cè)試大鼠的興趣感和快感；利用曠場(chǎng)試驗(yàn)(open fieldtest，OFT)檢測(cè)大鼠的自發(fā)活動(dòng)、自主探索能力等，共同來評(píng)定模型的抑郁狀態(tài)。
　　 3采用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)PSD大鼠模型海馬ARNT2蛋白的表達(dá)，采用半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction，RT-PCR)技術(shù)檢測(cè)PSD大鼠模

5、型海馬ARNT2、NPAS4 mRNA的表達(dá)，探究PSD大鼠模型海馬ARNT2、NPAS4表達(dá)與認(rèn)知功能損傷之間的關(guān)系。
　　 結(jié)果
　　 1行為學(xué)測(cè)定顯示：
　　 ①與對(duì)照組相比，PSD組和單純抑郁組大鼠體重增長(zhǎng)緩慢，造模完成后，單純抑郁組和PSD組體重與對(duì)照組組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=18.864，P=0.000)，單純抑郁組體重與PSD組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；
　　 ②造模完成后，

6、單純抑郁組(P<0.05)和PSD組(P<0.01)蔗糖水消耗量低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=8.766，P=0.000)，單純卒中組與對(duì)照組相比、單純抑郁組與PSD組相比差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；
　　 ③造模完成后，單純抑郁組和PSD組OFT水平、垂直運(yùn)動(dòng)均低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(FOFT水平=5.216，POFT水平=0.005；FOFT垂直=6.951，POFT垂直＝0.001；POFT水平<0.05

7、，POFT垂直<0.01)，單純抑郁組與PSD組相比、對(duì)照組和單純卒中組相比差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　 2免疫組織化學(xué)檢測(cè)顯示：?jiǎn)渭冏渲薪M和PSD組大鼠模型海馬各區(qū)ARNT2的平均光密度值均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(FCA1=14.248，PCA1=0.000；FCA2=14.374，PCA2=0.000；FCA3=17.569，PCA3=0.000)。
　　 3半定量RT-PCR檢測(cè)顯示：
　

8、　 ①單純卒中組(P<0.05)和PSD組(P<0.01)大鼠模型海馬ARNT2 mRNA的相對(duì)表達(dá)量均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=7.887，P=0.001)，單純卒中組與PSD組相比、單純抑郁組與對(duì)照組相比差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；
　　 ②單純抑郁組(P<0.01)和PSD組(P<0.05)大鼠模型海馬NPAS4 mRNA的相對(duì)表達(dá)量均低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=7.223，P=0.001)，單純抑