卒中后抑郁大鼠腦源性營(yíng)養(yǎng)因子的表達(dá)及氟西汀干預(yù)對(duì)照研究.pdf

1、研究背景：卒中后抑郁(Post stroke depression, PSD)是腦卒中后常見的并發(fā)癥,嚴(yán)重影響患者康復(fù)、增加其致殘率和死亡率,但PSD發(fā)生機(jī)制尚未闡明。近年來,抑郁動(dòng)物模型和臨床抑郁患者研究均表明,海馬內(nèi)腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(Brain-derived neurotrophic factor,BDNF)缺乏可能與抑郁癥發(fā)生密切相關(guān),而抗抑郁劑可逆轉(zhuǎn)之；內(nèi)源性BDNF能減少卒中后梗塞面積,并提示BDNF在腦卒中發(fā)生中的神經(jīng)保

2、護(hù)作用。因此,在建立卒中后抑郁大鼠模型的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步探討B(tài)DNF在卒中后抑郁中的表達(dá)水平及其作用,有利于進(jìn)一步探討B(tài)DNF在卒中后抑郁癥中作用機(jī)制,為BDNF可能用于臨床治療卒中后抑郁提供初步的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。目的：1.建立卒中后抑郁有效動(dòng)物模型。2.觀察向大鼠海馬內(nèi)注射外源性BDNF后對(duì)卒中后抑郁模型大鼠行為學(xué)的影響。3.觀察PSD模型大鼠海馬BDNF蛋白及mRNA表達(dá)水平,及抗抑郁劑氟西汀干預(yù)后BDNF表達(dá)水平的變化,探討B(tài)DNF在卒中

3、后抑郁中的作用機(jī)制。 方法：大腦中動(dòng)脈閉塞(MCAO)制備大鼠局灶腦缺血模型,加以慢性不可預(yù)見的溫和刺激結(jié)合孤養(yǎng)建立PSD模型并予氟西汀干預(yù)。分別采用蔗糖水試驗(yàn)、曠野試驗(yàn)(open-field test,OFT)、強(qiáng)迫游泳試驗(yàn)評(píng)估大鼠快感缺失、活動(dòng)減少、行為絕望等行為。在應(yīng)激第3天定向大鼠海馬內(nèi)注射BDNF,并評(píng)定大鼠行為學(xué)變化。經(jīng)蛋白免疫印跡(Western-blot)、Real time-PCR分別檢測(cè)應(yīng)激18天、28天時(shí)B

4、DNF蛋白及mRNA表達(dá)水平。 結(jié)果：1.應(yīng)激14天時(shí),與對(duì)照組及卒中組相比,PSD組體重增長(zhǎng)幅度顯著降低(P<0.05),經(jīng)氟西汀干預(yù)后體重增長(zhǎng)幅度明顯增加(P<0.01)。PSD組水平得分在應(yīng)激第7天時(shí)與對(duì)照組相比顯著降低(P<0.05);到應(yīng)激14天時(shí),PSD組與對(duì)照組及卒中組相比水平得分進(jìn)一步下降(P<0.01),并持續(xù)到應(yīng)激18天(P<0.01)。PSD組垂直得分在應(yīng)激14天時(shí)與對(duì)照組、卒中組相比均顯著下降(P<0.0

5、5或P<0.01),強(qiáng)迫游泳的不動(dòng)時(shí)間明顯延長(zhǎng)(P<0.05);而氟西汀干預(yù)后水平得分與垂直得分均顯著增加(P<0.05或P<0.01),不動(dòng)時(shí)間明顯縮短(P<0.01)。2.PSD注射高劑量BDNF組大鼠應(yīng)激第14天始,糖水消耗比例、水平及垂直得分均高于PSD組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01),而生理鹽水組和PSD注射低劑量BDNF組行為學(xué)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。3.與對(duì)照組相比,應(yīng)激14天后PSD組較對(duì)照

6、組大鼠體重與糖水消耗比例降低,水平、垂直試驗(yàn)得分下降,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01),氟西汀干預(yù)后糖水消耗比例,水平、垂直試驗(yàn)得分均PSD組顯著增加(P<0.05或P<0.01)。第18、28天,PSD組BDNF蛋白水平較對(duì)照組顯著下降(P<0.05或P<0.01)。PSD組BDNF mRNA的表達(dá)在應(yīng)激18天時(shí)較正常組有下降趨勢(shì),但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,至28天時(shí),表達(dá)含量明顯下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。第18、

7、28天,氟西汀組BDNF蛋白及mRNA水平均較PSD組顯著增加(P<0.01)。 結(jié)論：1.PSD模型大鼠較充分而持續(xù)表現(xiàn)出快感缺乏、活動(dòng)減少、行為絕望等“抑郁”核心癥狀,可操作性和重復(fù)性較好,是研究PSD較為理想的大鼠模型。氟西汀能改善PSD模型大鼠行為學(xué)異常。2.PSD注射高劑量BDNF組改善了擬PSD大鼠的快感缺乏、探索行為下降等抑郁“核心”癥狀, 提示了BDNF抗抑郁作用。3.PSD大鼠海馬BDNF蛋白及mRNA表達(dá)水平