積雪草甙治療伴有結(jié)節(jié)損害痤瘡的臨床觀察和實驗研究.pdf

1、目的：觀察積雪草甙聯(lián)合抗生素治療伴結(jié)節(jié)損害痤瘡的臨床療效及安全性，并通過免疫組化的方法了解在炎癥發(fā)展過程中，積雪草甙對IL-1β在組織中表達的影響。為積雪草甙在臨床的廣泛應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。 方法：一．臨床觀察。1．選取106例病人，均為我院痤瘡專科門診診斷為痤瘡并伴有結(jié)節(jié)損害的患者，隨機分為治療組和對照組。其中治療組56例，對照組50例。兩組在年齡、性別、病程上無顯著性差異(P>0.05)，具有可比性。2．治療組給予消痤合劑一日

2、2次，每次30ml；四環(huán)素一日三次，每次0.25g；積雪草甙片一日三次，每次24mg,，對照組僅給予四環(huán)素和消痤合劑，用法同上。3．設(shè)定一周為一個療程，共觀察4個療程。在用藥后第1、2、3、4周對患者的各種皮損進行計數(shù)，并對治療前后病情總療效和單純結(jié)節(jié)療效進行評分，同時記錄不良反應(yīng)。4．觀察結(jié)束后將數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，計數(shù)資料用x<'2>檢驗，計量資料用u檢驗。二．實驗研究。1．痤瘡丙酸桿菌培養(yǎng)：凍干痤瘡丙酸桿菌以腦心浸液溶解后，室溫下放

3、置數(shù)分鐘，取少許溶液培養(yǎng)于5％血液瓊脂，厭氧環(huán)境下35-37℃培養(yǎng)5-7天，用生理鹽水洗滌3次，調(diào)整痤瘡丙酸桿菌濃度為2×10<'10>/ml 備用。并經(jīng)鏡下觀察確定為棒狀痤瘡丙酸桿菌。2．造模：小鼠背部剪毛，約1×1厘米大小，每只小鼠三處，將已培養(yǎng)的痤瘡丙酸桿菌用生理鹽水稀釋兩次后接種注射到小鼠的皮下，每一點注射2000萬單位痤瘡丙酸桿菌，注射后每日觀察小鼠局部皮膚的變化。3．分組：將40只實驗小鼠隨機分為四組．積雪草甙+四環(huán)素組、積

4、雪草甙組、四環(huán)素組、空白對照組，每組 10只小鼠。4．灌胃：在造模后第7天，積雪草甙+四環(huán)素組給予積雪草甙混懸液 0.25ml(0.144mg/ml)和四環(huán)素混懸液0.25ml(1.5mg/ml)灌胃。積雪草甙組給予積雪草甙混懸液 0.25ml (0.144mg/ml)灌胃。四環(huán)素組給予四環(huán)素混懸液 0.25ml(1.5mg/ml)灌胃?？瞻讓φ战M給予生理鹽水0.25ml灌胃。按規(guī)定劑量于每日上午8-10時給藥。(《實驗動物學(xué)》湖北科學(xué)

5、技術(shù)出版社p277常用實驗動物及人的體表面積比例表)5．光鏡標(biāo)本制作及觀察：在造模后第 3、7、10、14、21天切除小鼠皮膚，10％甲醛固定，按石蠟切片常規(guī)處理，HE染色，在光鏡下觀察接種部位成纖維細胞顯微結(jié)構(gòu)的改變。6．免疫組化制作及觀察：石蠟切片后，采用SABC法染色，在光鏡下觀察。7．統(tǒng)計：在高倍鏡(10×40)下觀察組織中IL-1β表達陽性細胞的數(shù)量，共選取10個視野，取其平均數(shù)，采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件包，數(shù)據(jù)均以均數(shù)±

6、標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，組間計數(shù)資料用t檢驗。 結(jié)果：1．臨床觀察。治療組痊愈率 19.6％，顯效率 51.8％，總顯效率71.4％；對照組痊愈率 18％，顯效率34％，總顯效率52％；治療組總顯效率高于對照組，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析有顯著性差異(P<0.05)。治療組四周結(jié)節(jié)消退率60.7％，高于對照組42％，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析有顯著性差異(P<0.05)。 2．實驗。免疫組化結(jié)果：IL-1β在組織中表達的陽性細胞，其胞漿和胞核為褐色，

7、陽性細胞主要為成纖維細胞、淋巴細胞和巨噬細胞。給藥兩周后積雪草甙+四環(huán)素組和積雪草甙組中的陽性表達率低于四環(huán)素組和空白對照組，積雪草甙+四環(huán)素組和積雪草甙組與四環(huán)素組、空白對照組之間均有統(tǒng)計學(xué)意義，但積雪草甙+四環(huán)素組和積雪草甙組之間無統(tǒng)計學(xué)差異。 結(jié)論：積雪草甙聯(lián)合抗生素治療伴結(jié)節(jié)損害的痤瘡療效肯定，明顯優(yōu)于對照組。積雪草甙可能在炎癥早期誘導(dǎo) IL-1β在組織中表達減少，從而減輕炎癥反應(yīng)和抑制成纖維細胞的增生，促進炎性結(jié)節(jié)的消