?；疓hrelin對TNF-α誘導的脂肪細胞脂聯(lián)素及MCP-1分泌紊亂的影響.pdf

1、目的:
　　肥胖癥的最大危害不在于脂肪組織本身，而在于脂肪組織炎癥;近年的研究顯示:?；痝hrelin具有抗炎癥作用。本研究旨在探討?；痝hrelin是否可保護3T3-L1小鼠脂肪細胞免受TNF-α所介導的炎癥損傷。
　　方法:
　　實驗共分四組:空白對照組、TNF-α干預組、單純ghrelin處理組（?；痝hrelin1.5 pmol/L、15 pmol/L、150 pmol/L、1500pmol/L）以及gh

2、relin預處理+TNF-α干預組。TNF-α干預組:100 ng/mL濃度的TNF-α孵育3T3-L1小鼠脂肪細胞24 h;單純ghrelin處理組:酰基化ghrelin(1.5 pmol/L、15 pmol/L、150 pmol/L、1500 pmol/L)干預細胞28h。ghrelin預處理+TNF-α干預組:用不同濃度的?；痝hrelin(1.5 pmol/L、15 pmol/L、150 pmol/L、1500 pmol/L)

3、孵育3T3-L1小鼠脂肪細胞4h后，再加入TNF-α孵育3T3-L1（100 ng/mL）細胞24h;干預完成后分別用實時熒光定量PCR和Westem blotting檢測3T3-L1脂肪細胞上TLR4的表達，Western blotting檢測3T3-L1脂肪細胞內NF-κB p65磷酸化蛋白的表達，用ELISA方法檢測細胞上清液中脂聯(lián)素(Adiponectin)和單核細胞趨化蛋白-1(monocytechemotactic prot

4、ein1， MCP-1)的濃度。
　　結果:
　?、倥c空白對照組比較，TNF-α干預組3T3-L1小鼠脂肪細胞TLR4 mRNA和蛋白的表達水平、NF-κB p65磷酸化蛋白表達水平上調，脂肪細胞分泌MCP-1增多，脂聯(lián)素減少(P＜0.05)。
　?、谂c空白對照組比較，單純ghrelin干預組TLR4 mRNA和蛋白水平以及NF-κB p65磷酸化蛋白水平明顯下降(P＜0.05)，脂肪細胞分泌的脂聯(lián)素水平也下降（15

5、pM濃度開始，P＜0.05），但MCP-1僅有下降趨勢(P＞0.05)。
　?、叟cTNF-α(100 ng/mL)干預組比較，?；痝hrelin預孵育可拮抗TNF-α所致的3T3-L1小鼠脂肪細胞TLR4/NF-κB通路的活化，TLR4 mRNA和蛋白的表達水平以及NF-κB p65磷酸化蛋白水平下調(P＜0.05)，且呈劑量依賴性;但脂肪細胞MCP-1及脂聯(lián)素的分泌水平兩者之間差異無顯著性(P＞0.05)。
　　結論:<