MMP-2，9及TIMP-1在慢性腎衰竭大鼠動(dòng)脈鈣化形成中的表達(dá).pdf

1、目的：建立慢性腎衰竭血管鈣化大鼠模型；探討MMP-2、9及TIMP-1是否參與慢性腎衰竭動(dòng)脈血管鈣化的形成。 方法： (1) 用2﹪腺嘌呤每日250-300mg/kg灌胃制備慢性腎衰竭血管鈣化模型： (2) 應(yīng)用RT-PCR測(cè)定主動(dòng)脈MMP-2、9及TIMP-1mRNA水平； (3) 應(yīng)用Von Kossa染色觀察慢性腎衰竭大鼠主動(dòng)脈、腎動(dòng)脈、股動(dòng)脈、冠狀動(dòng)脈的鈣化情況；(4) 應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)TIMP-1、OPN、Ⅰ型

2、及Ⅳ型膠原蛋白在鈣化主動(dòng)脈的表達(dá)。以上測(cè)定及血清生化標(biāo)本的采集時(shí)間點(diǎn)為：灌胃后第2、4、6、8周。 結(jié)果： (1) 大鼠2周后出現(xiàn)明顯腎衰竭，血尿素氮、肌酐、血磷和鈣磷乘積持續(xù)增高； (2)Von Kossa染色顯示，6周后主動(dòng)脈、腎動(dòng)脈、股動(dòng)脈、冠狀動(dòng)脈血管中層出現(xiàn)不同程度的鈣化； (3) 鈣化主動(dòng)脈MMP9/TIMP-1比值較正常血管升高，而MMP2/TIMP-1比值較之下降；(4) 在鈣化的主動(dòng)脈中層平滑肌細(xì)胞TIMP-

3、1蛋白表達(dá)增多，并出現(xiàn)OPN的陽性表達(dá)。動(dòng)脈血管發(fā)生鈣化時(shí)Ⅰ型膠原蛋白表達(dá)增多，Ⅳ型膠原蛋白表達(dá)減少。 結(jié)論： (1) 大鼠腺嘌呤模型接近尿毒癥血管鈣化的發(fā)病機(jī)理，是很好的研究慢性腎衰竭血管鈣化的動(dòng)物模型。(2) 慢性腎衰竭發(fā)生血管鈣化時(shí)，ECM發(fā)生重構(gòu)，Ⅰ型膠原增多，Ⅳ型膠原減少，并且出現(xiàn)骨特異性蛋白OPN的陽性表達(dá)；MMP-2、MMP-9、TIMP-1比例失衡參與此過程的發(fā)生。 目的：探討慢性腎臟病患者血清、尿

4、TIMP-1 水平和 CKD 分期的關(guān)系和意義。 方法：用酶聯(lián)免疫法 (ELISA) 雙夾心法測(cè)定 122 例慢性腎臟病不同CKD分期患者和 40 名健康對(duì)照血清、尿 TIMP-1 水平，同時(shí)測(cè)定血胱蛋白酶抑制劑 C (CystC)、甲狀旁腺激素(PTH)、血脂等指標(biāo)，并對(duì)。TIMP-1 水平和CKD分期及其它指標(biāo)之間進(jìn)行比較及相關(guān)分析。 結(jié)果：慢性腎臟病患者血清及尿 TIMP-1水平增高(p<0.01)，且隨著CK