bFGF、MMP-9、TIMP-1在肺癌患者血清中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的:本研究旨在檢測(cè)肺癌患者和健康人的血清樣本中堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basic Fibroblast Growth Factor bFGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(Matrix Metalloproteinase-9 MMP-9)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1(Tissue Tnhibitor of Metalloproteinases-1 TIMP-1)的含量,探討堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、

2、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)在肺癌患者和健康人的血清樣本中的含量差異及其與腫瘤分化程度、臨床分期、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等病理特征的相關(guān)性,明確其對(duì)肺癌發(fā)生、發(fā)展的臨床意義。
　　方法:
　　1、收集收集甘肅省人民醫(yī)院住院的63例病理診斷為肺癌患者的血清標(biāo)本,收集標(biāo)本時(shí)患者均未接受手術(shù)、化療、放療治療。其中男性33例、女性30例;年齡為38歲-78歲,中位年齡59歲,平均年齡為57.46±7.48歲,分為三組:<45歲16例

3、、45歲-65歲22例、>65歲25例;按照病理類(lèi)型分為2組:非小細(xì)胞肺癌組34例(其中鱗癌14例、腺癌17例、細(xì)支氣管肺泡癌3例)、小細(xì)胞肺癌組29例;按照分期標(biāo)準(zhǔn)分為3組:I+II期17例、III期20例、IV期26例;按照淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況分為2組:N1+N2期37例、N3期26例;按照有無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移情況分為:有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者26例、無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者37例;按照分化程度分為3組:低分化組24例、中分化組15例、高分化組24例;按照腫瘤大小范圍3

4、組:<3cm18例、3cm-5cm25例、>5cm20例;按照吸煙情況分為2組:有吸煙者39例、無(wú)吸煙者24例。
　　參與試驗(yàn)患者排除條件:①已經(jīng)放、化療治療的患者;②COPD、哮喘、肺心病、肺間質(zhì)纖維化患者;③有明確結(jié)締組織疾病的患者;④有冠心病、糖尿病病史的患者。
　　同時(shí)收集甘肅省人民醫(yī)院體檢中心43例健康人的血清標(biāo)本作為對(duì)照組,其中男性23例、女性20例;年齡為39歲-80歲、中位年齡57歲,平均年齡為53.46±7

5、.26歲,分為三組:<45歲11例、45歲-65歲14例、>65歲18例;按照吸煙情況分為兩組:有吸煙者21例、無(wú)吸煙者22例。
　　2、所有患者均在未接受任何治療的情況下,空腹抽取外周靜脈血5ml入不加抗凝劑的干燥無(wú)菌管中。所有標(biāo)本均在采集后室溫放置30mim后,2小時(shí)內(nèi)2000r/min離心10分鐘,然后用無(wú)菌吸管將血清吸取移放在2.0ml的EP管內(nèi),編號(hào)密封置于-80℃冰箱中保存待測(cè)。健康對(duì)照組血清標(biāo)本來(lái)源于甘肅省人民醫(yī)院體

6、檢中心,標(biāo)本采集方法及處理同上。標(biāo)本收集過(guò)程中注意避免反復(fù)凍融。
　　3、采用酶聯(lián)免疫吸附(Enzyme-linked immunoadsorbent assay ELISA)雙抗體夾心法檢測(cè)甘肅省人民醫(yī)院體檢中心體檢健康者43例(正常對(duì)照組)、甘肅省人民醫(yī)院住院的肺癌患者63例(肺癌組)血清樣本中的堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的含量,含量結(jié)果以p

7、g/ml表示。
　　4、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:采用SPSS19.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)量資料數(shù)據(jù)均采用x±s表示,所有數(shù)據(jù)在統(tǒng)計(jì)處理前均經(jīng)正態(tài)分布和方差齊性檢驗(yàn),符合t檢驗(yàn)的條件。兩組之間采用獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn),組內(nèi)不同程度比較采用單因素ANOVA的t檢驗(yàn);正態(tài)分布的變量之間的相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析的方法。所有的統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)均為雙側(cè)檢驗(yàn),以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　　1、肺癌組血清中bFGF、

8、MMP-9、TIMP-1含量分別為846.25±9.64pg/ml、598.42±21.84pg/ml、600.05±3.58pg/ml,健康對(duì)照組血清bFGF、MMP-9、TIMP-1水平分別為192.18±7.65pg/ml、548.56±19.87pg/ml、359.82±5.76pg/ml。兩組比較,肺癌組均明顯高于健康對(duì)照組,具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
　　2、按照一般臨床特征(年齡、吸煙情況、性別)分組后,肺

9、癌組和健康對(duì)照組血清中堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的含量進(jìn)行組間和組內(nèi)對(duì)比。
　?、佟凑漳挲g分組:肺癌患者中<45歲組血清中堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的含量分別為819.16+6.54pg/ml、597.76+6.61pg/ml、598.70+27.87pg/m

10、l,45歲-65歲組血清中堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的含量分別為854.91+8.95pg/ml、598.54+5.85pg/ml、602.79+20.23pg/ml,>65歲組血清中堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的含量分別為835.89+9.84pg/ml、601.23

11、+3.42pg/ml、591.97+22.81pg/ml,按照不同年齡分段分組后對(duì)比肺癌組內(nèi)血清bFGF、MMP-9和TIMP-1含量無(wú)顯著差異(P>0.05);健康對(duì)照人中<45歲組血清中堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的含量分別為192.15+8.64pg/ml、417.78+9.78pg/ml、358.37+22.67pg/ml,45歲-65歲組血清中

12、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的含量分別為193.04+9.64pg/ml、498.34+8.67pg/ml、354.54+18.94pg/ml,>65歲組血清中堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的含量分別為191.08+8.64pg/ml、521.18+4.26pg/ml、33

13、1.26+19.24pg/ml,按照不同年齡分段分組后對(duì)比健康對(duì)照組內(nèi)血清bFGF、MMP-9和TIMP-1含量無(wú)顯著差異(P>0.05);兩組間按照不同年齡分段分組后對(duì)比肺癌組血清bFGF、MMP-9和TIMP-1含量均顯著高于健康對(duì)照組(P<0.01)。
　?、凇凑瘴鼰熐闆r分組:肺癌患者中吸煙組患者血清中堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的含量分別

14、為851.64+9.64pg/ml、599.50+3.92pg/ml、601.21+16.12pg/ml;無(wú)吸煙患者血清中堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的含量分別為846.16+8.65pg/ml、599.07+24.30pg/ml、595.39+6.43pg/ml,按照吸煙情況分組后對(duì)比肺癌組內(nèi)血清bFGF、MMP-9和TIMP-1含量無(wú)顯著差異(P>0

15、.05);健康人中吸煙者血清中堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的含量分別為192.05+5.74pg/ml、509.06+4.81pg/ml、378.28+18.02pg/ml;無(wú)吸煙者血清中堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因-1(TIMP-1)的含量分別為191.08+6.85pg/ml、498.37

16、+18.67pg/ml、395.36+8.93pg/ml,按照吸煙情況分組后對(duì)比肺癌組內(nèi)血清bFGF、MMP-9和TIMP-1含量無(wú)顯著差異(P>0.05);兩組間按照吸煙情況分組后對(duì)比肺癌組血清bFGF、MMP-9和TIMP-1含量均顯著高于健康對(duì)照組(P<0.01)。
　?、?、按照性別分組:肺癌男性患者血清中堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的含量分

17、別為864.25+9.25pg/ml、599.50+3.92pg/ml、601.21+16.12pg/ml;女性患者血清中堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的含量分別為862.15+7.64pg/ml、599.07+24.30pg/ml、595.39+6.43pg/ml,按照性別分組后對(duì)比肺癌組內(nèi)血清bFGF、MMP-9和TIMP-1含量無(wú)顯著差異(P>0.0

18、5);男性健康對(duì)照者血清中堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的含量分別為190.08+5.84pg/ml、509.06+4.81pg/ml、378.28+18.02pg/ml;女性健康對(duì)照者血清中堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的含量分別為198.14+6.25pg/ml、498.

19、37+18.67pg/ml、395.36+8.93pg/ml,按照吸煙情況分組后對(duì)比肺癌組內(nèi)血清bFGF、MMP-9和TIMP-1含量無(wú)顯著差異(P>0.05);兩組間按照性別分組后對(duì)比肺癌組血清bFGF、MMP-9和TIMP-1含量均顯著高于健康對(duì)照組(P<0.01)。
　　3、按照病理類(lèi)型分組后肺癌血清bFGF、MMP-9、TIMP-1含量對(duì)比:非小細(xì)胞肺癌組的血清bFGF、MMP-9、TIMP-1水平分別為838.76±5.

20、76pg/ml、598.76±19.76pg/ml、600.01±2.98pg/ml,小細(xì)胞肺癌組血清bFGF、MMP-9、TIMP-1水平分別為841.65±9.84pg/ml、601.84±21.08pg/ml、598.81±5.76pg/ml,兩組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　4、肺癌血清TIMP-1和MMP-9、bFG含量與臨床病理特征的關(guān)系:
　?、?、按照國(guó)際抗癌聯(lián)盟(UICC)2009年制定的分期標(biāo)準(zhǔn)分

21、為4期:I期5例,II期12例,III期20例,IV期26例;其中肺癌I期和II期的患者17例為早期組,肺癌III期和IV期的患者46例為晚期組。經(jīng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)兩組的血清TIMP-1和MMP-9、bFGF水平屬于正態(tài)分布,采用t檢驗(yàn),晚期肺癌患者血清TIMP-1、MMP-9、bFGF水平分別為614.93+19.60pg/ml、609.17+6.14pg/ml、896.29+60.94pg/ml,早期肺癌患者血清TIMP-1、MMP-9、b

22、FGF水平566.69+19.70pg/ml、573.76+5.01pg/ml、562.64+13.84pg/ml。組內(nèi)比較,晚期肺癌患者血清TIMP-1、MMP-9、bFGF水平明顯高于早期肺癌患者血清TIMP-1、MMP-9、bFGF水平,具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　?、?、本次所收集的肺癌患者中,低分化組有24例、中分化組有15例、高分化組有24例。經(jīng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)兩組的血清TIMP-1和MMP-9、bFGF水平屬于正態(tài)

23、分布,采用t檢驗(yàn)。低分組TIMP-1、MMP-9、bFGF水平分別為607.32+19.73pg/ml、603.43+4.39pg/ml、941.92+9.16pg/ml;中分化組TIMP-1、MMP-9、bFGF水平分別為589.53+21.65pg/ml、589.53+21.65pg/ml、867.66+5.08pg/ml;高分化組TIMP-1、MMP-9、bFGF水平分別為596.14+7.85pg/ml、564.14+18.95

24、pg/ml、768.14+9.84pg/ml。組內(nèi)比較結(jié)果提示隨著肺癌分化程度增高肺癌患者血清TIMP-1和MMP-9、bFGF明顯下降,具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　③、本次所收集的肺癌患者中發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組有26例,未發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組有37例。經(jīng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)兩組血清TIMP-1、MMP-9、bFGF水平屬于正態(tài)分布,采用t檢驗(yàn)。遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組患者血清TIMP-1、MMP-9、bFGF水平分別為600.62+19.54pg/ml

25、、606.77+4.12pg/ml、996.28+6.84pg/ml;未發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組患者血清TIMP-1、MMP-9、bFGF水平分別為578.70+18.71pg/ml、587.78+4.48pg/ml、846.21+7.28pg/ml。組內(nèi)比較,遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組肺癌患者血清TIMP-1、MMP-9、bFGF水平均明顯高于未發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組患者血清TIMP-1、MMP-9、bFGF水平,具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　?、?、本

26、次所收集的肺癌患者根據(jù)淋巴轉(zhuǎn)移情況分為兩組,N1+N2期37例、N3期26例。經(jīng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)兩組的血清TIMP-1、MMP-9、bFGF水平屬于正態(tài)分布,采用t檢驗(yàn)。N3期肺癌患者血清TIMP-1、MMP-9、bFGF含量分別為640.23+19.54pg/ml、592.12+3.61pg/ml、921.08+8.24pg/ml,N1+N2期血清TIMP-1、MMP-9、bFGF含量分別為541.20+23.80pg/ml、588.21+5

27、.44pg/ml、846.21+7.28pg/ml。組內(nèi)比較,N3期肺癌患者血清TIMP-1、MMP-9、bFGF含量明顯高于N1+N2期血清TIMP-1、MMP-9、bFGF含量,具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　⑤、本次所收集的肺癌患者根據(jù)腫瘤大小分為三組,<3cm組18例、3-5cm組25例、>5cm組20例。經(jīng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)三組的血清TIMP-1、MMP-9、bFGF水平屬于正態(tài)分布,采用t檢驗(yàn)。>5cm組肺癌患者血清T

28、IMP-1、MMP-9、bFGF水平分別為618.78+4.65pg/ml、615.33+23.21pg/ml、896.27+8.65pg/ml;3-5cm肺癌組患者血清TIMP-1、MMP-9、bFGF水平分別為606.87+20.77pg/ml、597.36+8.39pg/ml、814.16+11.28pg/ml;<3cm肺癌組患者血清TIMP-1和MMP-9、bFGF水平分別為574.45+25.69pg/ml、592.11+3.

29、59pg/ml、792.18+9.16pg/ml。組內(nèi)比較,>5cm組肺癌患者血清TIMP-1、MMP-9、bFGF水平明顯高于3-5cm肺癌組和<3cm肺癌組患者血清TIMP-1、MMP-9、bFGF水平;同樣,3-5cm肺癌組血清TIMP-1、MMP-9、bFGF水平明顯高于<3cm肺癌組患者血清TIMP-1、MMP-9、bFGF水平,具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　5、經(jīng)Pearson相關(guān)性檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)肺癌患者血清中堿

30、性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)和基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)顯著相關(guān)(r=0.807,P<0.01);基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)和基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)顯著相關(guān)(r=0.783,P<0.01);堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)和基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)相關(guān)不顯著(r=0.142,P<0.01)。
　　結(jié)論:
　　1、肺癌患者血清中堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)、基質(zhì)金屬

31、蛋白酶-9(MMP-9)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的含量明顯均高于健康對(duì)照組,提示其可作為肺癌血清腫瘤標(biāo)志物之一,對(duì)肺癌的診斷有一定的幫助。
　　2、肺癌患者血清中堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的含量與患者的年齡、性別、吸煙狀況無(wú)明顯相關(guān)性,結(jié)果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。
　　3、肺癌患者血清中堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bF

32、GF)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的含量與肺癌細(xì)胞的病理類(lèi)型無(wú)明顯的相關(guān)性,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。
　　4、肺癌患者血清中堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)和基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的含量與肺癌細(xì)胞的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、TNM分期、分化程度密切相關(guān),即腫瘤發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移時(shí),血清中堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)和基質(zhì)金屬蛋白酶-9(

33、MMP-9)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)含量明顯增高;III、IV期患者血清bFGF、TIMP-1、MMP-9含量明顯高于I、II期;低分化組患者血清堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)和基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)含量明顯高于中分化和高分化組。
　　5、肺癌患者血清中bFGF、MMP-9、TIMP-1的含量經(jīng)Pearson相關(guān)性檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)bFGF和MMP-9顯著相關(guān)(r