魔芋飛粉中神經(jīng)酰胺的提取與分離鑒定.pdf

1、神經(jīng)酰胺(ceramide)是由神經(jīng)鞘氨醇(sphingosine)和長(zhǎng)鏈脂肪酸縮合而成的酰胺，主要存在于角質(zhì)層的細(xì)胞膜和細(xì)胞間基質(zhì)中。神經(jīng)酰胺最早是從動(dòng)物的神經(jīng)鞘中分離得到，由此而得名，后來(lái)，人們又陸續(xù)從眾多的海洋生物如海星、海葵、海綿、珊瑚中分離得到，也從被囊類(lèi)動(dòng)物和某些高等植物如大豆、洋蔥中得到。 由于神經(jīng)酰胺在化妝品中具有的高效保濕、美白和屏障作用，以及在醫(yī)學(xué)、分子生物學(xué)等領(lǐng)域日益廣泛的應(yīng)用，使得神經(jīng)酰胺的提取和純化分離

2、更加廣泛。而隨著瘋牛病等動(dòng)物性疾病的發(fā)生，動(dòng)物源性神經(jīng)酰胺的安全性受到了人們的質(zhì)疑，同時(shí)工業(yè)上化學(xué)合成的神經(jīng)酰胺的安全性也對(duì)人體有較大的危害。因而，從上世紀(jì)末期開(kāi)始，科學(xué)家們轉(zhuǎn)而向更安全更低廉的植物源性神經(jīng)酰胺展開(kāi)了研究。現(xiàn)階段，已經(jīng)有很多植物中的神經(jīng)酰胺的分子結(jié)構(gòu)被鑒定出來(lái)，從而為神經(jīng)酰胺單體在醫(yī)藥、化妝品和食品等方面的廣泛應(yīng)用提供了前提?，F(xiàn)有的研究表明，魔芋的表皮中含有大量的神經(jīng)酰胺，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于已經(jīng)進(jìn)行研究過(guò)的植物，但是在加工成魔芋精

3、粉的過(guò)程中。這些表皮組分卻作為廢棄物而留在了魔芋飛粉中。因而，對(duì)魔芋飛粉中神經(jīng)酰胺的提取和鑒定尤為重要。 本試驗(yàn)首次對(duì)魔芋飛粉中神經(jīng)酰胺的提取作了初步探索，由于神經(jīng)酰胺結(jié)構(gòu)的特殊性，本試驗(yàn)主要以神經(jīng)酰胺粗提物作為各項(xiàng)指標(biāo)的參考標(biāo)準(zhǔn)。試驗(yàn)首先比較了兩種不同提取溶劑(氯仿和乙醇)的提取效果，以及振蕩浸提和超聲波浸提的提取效果，從而確定提取溶劑和所采用的提取方法。然后通過(guò)單因素試驗(yàn)，確定提取溫度、時(shí)間、料液比和提取溶劑對(duì)提取效果的影響

4、，通過(guò)正交試驗(yàn)確定提取的最佳工藝參數(shù)，并與柱層析(LSC)和薄層層析(TLC)等手段相結(jié)合，提取分離魔芋飛粉中的神經(jīng)酰胺成分，用紫外光譜、紅外光譜、質(zhì)譜和核磁共振等方法，結(jié)合文獻(xiàn)鑒定了其中神經(jīng)酰胺單體化合物的分子結(jié)構(gòu)。其結(jié)果如下： 1.采用單因素試驗(yàn)與正交實(shí)驗(yàn)相結(jié)合的方法，分析了提取溶劑濃度(D)、料液比(B)、溫度(C)和時(shí)間(A)對(duì)魔芋飛粉中神經(jīng)酰胺得率的影響。其影響程度由大到小依次為C>B>A>D，即溫度>料液比>時(shí)間>溶

5、劑濃度，影響最小的為溶劑的濃度。通過(guò)實(shí)驗(yàn)得到優(yōu)化的神經(jīng)酰胺提取工藝參數(shù)為：提取溫度60℃，提取時(shí)間35min，提取料液比1：4，提取溶劑為90％乙醇。神經(jīng)酰胺粗提物的最高提取率可以高達(dá)2.89％。 2.采用柱層析(LSC)、薄層層析(TLC)和溶劑結(jié)晶相結(jié)合的方法分離得到一個(gè)神經(jīng)酰胺單體化合物，通過(guò)本實(shí)驗(yàn)得到了一條分離純化該化合物的詳細(xì)的工藝路線。并利用紅外光譜、紫外光譜、質(zhì)譜和核磁共振等方法，結(jié)合文獻(xiàn)鑒定了該單體化合物分子式