樹莓葉黃酮類物質(zhì)的提取、純化及抗氧化性的研究.pdf

1、近年來，活性氧和自由基研究成為現(xiàn)代生命科學(xué)的前沿和熱點，評價和篩選具有強抗氧化活性的天然產(chǎn)物已成為生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和食品科學(xué)研究的新趨勢。樹莓葉中含有大量的黃酮類化合物，是開發(fā)天然抗氧化劑的重要來源。本文以這些作為廢棄物的樹莓葉為原料，研究了樹莓葉中黃酮類物質(zhì)的提取工藝及不同預(yù)處理方法、不同溶劑提取和不同采摘季節(jié)對黃酮得率的影響，針對不同預(yù)處理方法、不同季節(jié)、不同溶劑和不同提取方法樹莓葉提取物，采用化學(xué)體系產(chǎn)生自由基和脂質(zhì)過氧化體系，研究其

2、清除自由基和抑制脂質(zhì)過氧化的能力，采用具有工業(yè)應(yīng)用價值的樹脂法研究了樹莓葉黃酮的純化工藝，在此基礎(chǔ)上研究了樹莓葉黃酮純化前后抗氧化性。結(jié)果如下： ⑴樹莓葉黃酮提取工藝?；亓鞣ㄌ崛漭~黃酮優(yōu)化條件為：以80％的乙醇為提取溶劑，提取溫度90℃，提取時間1h，料液比1：25，在此條件下黃酮類物質(zhì)的得率為3.95％；超聲波提取樹莓葉黃酮優(yōu)化條件為：以60％的乙醇為提取溶劑，提取溫度60℃，提取時間為50min，料液比1：25，在此條件

3、下黃酮類物質(zhì)的得率達到5.72％；微波提取樹莓葉黃酮優(yōu)化條件為：以50％的乙醇為提取溶劑，提取時間為5min，料液比為1：30，功率300W，在此條件下黃酮類物質(zhì)的得率達到6.12％。不同預(yù)處理方法、不同季節(jié)和不同溶劑提取物中黃酮含量不同，經(jīng)燙后冷凍干燥處理的提取物中黃酮含量高于其他預(yù)處理方法；八月份提取物黃酮含量高于其他月份；甲醇提取物黃酮含量高于其他溶劑提取物。比較三種不同提取方法，微波提取黃酮得率最高，且大大縮短提取時間，因此認(rèn)為

4、用微波提取較好，本試驗以后均采用微波提取。 ⑵樹莓葉黃酮抗氧化性研究。測定不同預(yù)處理方法、不同季節(jié)、不同溶劑和不同提取方法提取物抗氧化性，清除自由基和抑制脂質(zhì)過氧化的能力依次為：燙后真空冷凍干燥>直接真空冷凍干燥>燙后烘箱干燥>直接烘箱干燥；八月份>七月份>九月份>十月份；甲醇提取物>乙醇提取物>丙酮提取物>乙酸乙酯提取物；微波提取>超聲波提取>回流提取。 ⑶樹莓葉黃酮純化工藝及純化前后抗氧化性。比較AB-8、NKA-9

5、和X-5三種樹脂，結(jié)果表明AB-8具有較高的吸附量和解吸率，分別為20.44mg/g和86.51％。樹莓葉純化工藝優(yōu)化條件為：選用AB-8樹脂為吸附劑，上樣液pH為4～5，上樣液流速為1ml/min，上樣液濃度為1.2～1.6mg/ml，洗脫流速為1.5ml/min，洗脫劑乙醇的濃度為60％～70％，純化前粗提液中黃酮純度為7.95％，純化后產(chǎn)品純度為30.46％。樹莓葉提取物經(jīng)過純化后，抗氧化能力明顯上升，當(dāng)黃酮加入量為200ug時，