小麥葉銹菌冬孢子萌發(fā)與轉(zhuǎn)主寄主分子驗(yàn)證.pdf

1、由小麥葉銹菌（Puccinia triticina）引起的小麥葉銹病是世界麥區(qū)普遍發(fā)生的病害之一，每年給小麥生產(chǎn)造成巨大損失。小麥葉銹菌新毒性小種的產(chǎn)生是導(dǎo)致小麥抗病品種喪失抗病性的主要原因之一。有性階段在病原物遺傳變異中起重要作用，小麥葉銹菌通過有性生殖可產(chǎn)生更多基因型重組的生理小種，在適宜條件下，可造成小麥葉銹病大流行。在我國(guó)室內(nèi)試驗(yàn)中，小麥葉銹菌已成功接種亞歐唐松草(Thalictrum minusL)和瓣蕊唐松草（T.petal

2、oideum L）。但由于其冬孢子萌發(fā)率很低，接種成功率較低且在自然條件下對(duì)我國(guó)小麥葉銹病發(fā)生所起的作用尚未完全明確?；谝陨蠁栴}本研究應(yīng)用生物學(xué)及分子生物學(xué)技術(shù)對(duì)小麥葉銹菌冬孢子萌發(fā)、轉(zhuǎn)主寄主上銹菌分子檢測(cè)等進(jìn)行了探索，初步獲得了一些成果:
　　1、對(duì)小麥葉銹菌冬孢子萌發(fā)條件研究表明，小麥葉銹菌冬孢子萌發(fā)最適溫度為14～16℃，在16℃時(shí)萌發(fā)率達(dá)到最高，為42％;在16℃下冬孢子在第2天開始萌發(fā)，第4天和6天時(shí)冬孢子萌發(fā)達(dá)到最高

3、峰，萌發(fā)率在40％以上，第8天時(shí)萌發(fā)率迅速下降，為16％，第10天時(shí)基本觀察不到萌發(fā)的冬孢子;不同濃度水瓊脂培養(yǎng)基對(duì)小麥葉銹菌冬孢子萌發(fā)無(wú)影響。
　　2、經(jīng)調(diào)查內(nèi)蒙古卓資、河北承德及河北崇禮等地唐松草分布廣泛，分別鑒定為瓣蕊唐松草（T.petaloideum）、亞歐唐松草（T.minus）及展枝唐松草（T.squarrosum），且在這些唐松草上都有銹病發(fā)生。以往認(rèn)為唐松草主要通過根繁殖，為建立唐松草快速繁殖體系，方便進(jìn)行生物學(xué)接

4、種，對(duì)唐松草種子萌發(fā)溫度進(jìn)行了篩選。唐松草種子最適萌發(fā)溫度為20℃，第21天萌發(fā)率達(dá)到最大值，為89％;在10℃、25℃以上不能萌發(fā)。
　　3、利用21對(duì)EST-SSR引物、30對(duì)SSR引物及40對(duì)小麥葉銹菌EST引物建立了2對(duì)小麥葉銹菌特異分子標(biāo)記EST-6和EST-23，可在小麥葉銹菌中分別擴(kuò)增出625bp和384bp的特異片段。
　　4、利用特異性引物EST-6對(duì)內(nèi)蒙古卓資、河北承德及河北崇禮唐松草上的銹菌進(jìn)行分子驗(yàn)證