平菇原生質(zhì)體再生及無(wú)性變異株的初篩.pdf

1、平菇(Pleurotus ostreatus)是一類重要的食用菌，其適應(yīng)性強(qiáng)，栽培原料來(lái)源廣，產(chǎn)量高，效益好，近年來(lái)發(fā)展迅猛，已成為城鄉(xiāng)人民大眾化的菌類蔬菜。但是，目前平菇產(chǎn)業(yè)發(fā)展面臨著品種由于長(zhǎng)期無(wú)性繁殖而退化明顯、產(chǎn)量不穩(wěn)、育種手段單一等實(shí)際問(wèn)題，為了提高育種的效果和加速品種更新?lián)Q代，本實(shí)驗(yàn)采用原生質(zhì)體再生技術(shù)進(jìn)行平菇新菌株的選育，對(duì)平菇原生質(zhì)體制備及再生條件進(jìn)行優(yōu)化，將得到的再生菌株進(jìn)行初步篩選的一系列試驗(yàn)，旨從細(xì)胞水平上探索一條

2、食用菌育種新途徑，為發(fā)展和完善食用菌新菌株選育提供依據(jù)。 1.本試驗(yàn)對(duì)影響平菇原生質(zhì)體制備及再生條件的幾大因素綜合酶種類、酶濃度、菌齡、酶解溫度、酶解時(shí)間、穩(wěn)滲劑及培養(yǎng)基等條件進(jìn)行了研究，結(jié)果表明，以PDA液體綜合培養(yǎng)基培養(yǎng)5d的幼嫩菌絲體，單一酶以2％濃度的溶壁酶或混合酶以1％的纖維素酶和1％的蝸牛酶，在30℃下作用3h，以0.6mol/IL的MgSO4為滲透壓穩(wěn)定劑是制備平菇原生質(zhì)體的最佳條件；以菌齡為3d，酶解時(shí)間為1h，

3、0.6mol/L的MgS04為滲透壓穩(wěn)定劑的PDA再生綜合培養(yǎng)基為原生質(zhì)體再生的最佳條件，再生率最高達(dá)到4.35％。 2.采用優(yōu)化的條件進(jìn)行原生質(zhì)體的制備與再生，最終再生出98個(gè)再生菌株，對(duì)再生植株菌絲體進(jìn)行鏡檢，獲得47個(gè)具有鎖狀聯(lián)合的菌株。將再生菌株分別與出發(fā)菌株進(jìn)行拮抗試驗(yàn)，獲得39個(gè)再生菌株菌絲與其親本有明顯的拮抗線。 3.通過(guò)對(duì)39個(gè)再生菌株與出發(fā)菌株的菌絲顏色、密度、生長(zhǎng)勢(shì)等方面的比較試驗(yàn)，得到各方面優(yōu)于出發(fā)

4、菌株的再生植株。在平板中進(jìn)行菌絲長(zhǎng)速測(cè)定發(fā)現(xiàn)，各菌株間長(zhǎng)速有差異性，7、11、13、17、26、36、37高于出發(fā)菌株，生長(zhǎng)速度與生長(zhǎng)勢(shì)有相關(guān)性。對(duì)栽培種進(jìn)行長(zhǎng)速測(cè)定發(fā)現(xiàn)，各菌株差異顯著，而且和平板中菌絲長(zhǎng)速相關(guān)，平板中長(zhǎng)速快的，栽培種的長(zhǎng)速也快。 4.抗綠霉試驗(yàn)獲得在抗雜能力優(yōu)于出發(fā)菌株的再生菌株，通過(guò)抗綠霉試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)1、3、7、14、18、24、25、26、30、33、37、38這幾個(gè)再生菌株與綠霉的拮抗線寬于出發(fā)菌株，說(shuō)明